探索IL-6對乳腺癌細胞發(fā)生浸潤和侵襲的影響.pdf

1、目的：
　　IL-6作為一種細胞因子，可以發(fā)揮廣泛的生物學作用，在機體的免疫調(diào)節(jié)、調(diào)控多種細胞的增殖與分化等過程扮演重要角色。IL-6在多種惡性腫瘤血清中顯著升高，我們的前期研究結果顯示乳腺癌血清中 IL-6高水平表達可以作為預測患者預后不良的指標，但血清中 IL-6的來源及其影響乳腺癌患者預后的機制不明確；上皮-間質(zhì)轉化（EMT）在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中扮演重要角色，是惡性腫瘤侵襲和轉移過程中的重要細胞學基礎。本研究目的在于探究

2、 IL-6在乳腺癌組織中的分布、表達情況及其臨床意義，并進一步探究 IL-6是否通過誘導乳腺癌細胞發(fā)生EMT而影響乳腺癌細胞系的生物學行為及功能。
　　方法：
　　1.我們應用免疫組織化學染色的方法檢測68例乳腺癌組織標本中IL-6、上皮-間質(zhì)轉化過程中的上皮標志物E-Cadherin及間質(zhì)標志物β-catenin、Vimentin的表達，分別分析腫瘤源性 IL-6的不同表達水平與乳腺癌患者臨床病理特征之間的相關關系及與上皮

3、-間質(zhì)轉化過程中的上皮標志物 E-Cadherin及間質(zhì)標志物β-catenin、Vimentin表達的相關性。
　　2.采用 RT-PCR的方法檢測兩種常見乳腺癌細胞系 MCF-7及 MDA-MB-231細胞中IL-6的mRNA水平，根據(jù)RT-PCR的實驗結果進行分組。
　　3.利用細胞劃痕實驗及Transwell細胞遷移、侵襲實驗測試不同處理組細胞的遷移和侵襲能力。
　　4.通過Westernblot實驗方法檢測不

4、同處理組的乳腺癌細胞EMT相關蛋白的表達情況。
　　結果：
　　1.IL-6定位于乳腺癌患者的癌巢組織中，非癌巢周圍的間質(zhì)組織，表現(xiàn)出腫瘤源性的IL-6表達；68例乳腺癌患者的組織中，36例表現(xiàn)出高表達IL-6，高表達率為52.9％。
　　2.乳腺癌患者組織中腫瘤源性IL-6的表達水平與淋巴結轉移（p＝0.003）、病理學分期（p＝0.012）顯著相關；而與乳腺癌患者的年齡、流產(chǎn)史、月經(jīng)狀態(tài)、BMI、家族史、脈管癌栓、

5、雌孕激素受體、HER-2狀態(tài)、Ki-67及P53表達無明顯相關性（p＞0.05）。
　　3.乳腺癌患者組織中的腫瘤源性IL-6的表達與上皮標志物E-cadherin的表達成負相關( r＝-0.320，p＝0.008)，而與間質(zhì)標志物β-catenin（r＝0.267，p＝0.028）及Vimentin（r＝0.281，p＝0.020）的表達成正相關，且差別均有統(tǒng)計學意義。
　　4.MDA-MB-231細胞 IL-6的 mRN

6、A表達水平顯著高于 MCF-7細胞（p＝0.0004）。
　　5.外源性IL-6使MCF-7細胞的遷移和侵襲能力增強，而中和MDA-MB-231細胞分泌的IL-6后，其遷移和侵襲能力顯著減弱。
　　6.IL-6促進MCF-7細胞發(fā)生EMT表型變化，而中和MDA-MB-231細胞分泌的IL-6后，其自身EMT表型被逆轉。
　　結論：
　　1.腫瘤源性IL-6是促進乳腺癌患者發(fā)生浸潤和轉移的不良因素；
　　2.