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文檔簡介
1、目的:探討聯(lián)合下調(diào)紡錘體驅(qū)動蛋白基因(KSP)和上調(diào)CDH1基因的表達對肺癌A549細胞增殖和侵襲的影響。
方法:通過轉(zhuǎn)染試劑,將靶向KSP基因的siRNA和靶向CDH1基因啟動子的saRNA轉(zhuǎn)染到A549細胞中。按照轉(zhuǎn)染混合物的不同和對比對照組將細胞劃分為五組,分別是A組、B組、C組、D組和E組。MTT法檢測細胞增殖能力。熒光定量PCR法檢測KSP和CDH1基因mRNA的表達變化情況。通過免疫印跡(Western Blot)
2、法檢測細胞內(nèi)KSP和E-鈣黏蛋白的表達情況,通過Transwell侵襲實驗進行A549細胞侵襲能力的檢測。
結(jié)果:siRNA和saRNA處理A549細胞后,細胞增殖能力和穿過基底膜的A549細胞個數(shù)顯著減少(p<0.05),熒光定量PCR結(jié)果顯示,siRNA顯著下調(diào)KSP的mRNA的表達(p<0.05);saRNA顯著上調(diào)CDH1基因mRNA的表達(p<0.05)。蛋白質(zhì)免疫印跡檢測結(jié)果顯示,KSP蛋白表達量顯著降低(p<0.
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