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文檔簡介
1、目的:本文旨在聯(lián)合下調(diào)MAEL和上調(diào)CDH1基因的表達研究其對肝癌HepG2細胞遷移、侵襲和增殖的作用。
方法:通過轉(zhuǎn)染試劑,靶向MAEL基因的siRNA和靶向CDH1基因啟動子的saRNA轉(zhuǎn)染到HepG2細胞中。按照轉(zhuǎn)染混合物的不同將細胞劃分為五組,分別是CT組、NC組、778組、215組和778+215組。采用熒光定量PCR法檢測MAEL和CDH1基因mRNA的表達情況,Western Blot法檢測MAEL、E-鈣黏蛋白
2、、Caspase-3和Bcl-2的蛋白表達情況,MTT法檢測細胞增殖能力,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,Transwell侵襲實驗檢測細胞侵襲能力。
結(jié)果:siRNA-778和saRAN-215處理HepG2細胞后,熒光定量PCR結(jié)果顯示,siRNA-778顯著下調(diào)MAEL基因mRNA的表達(p<0.05);saRNA-215顯著上調(diào)CDH1基因mRNA的表達(p<0.05)。蛋白質(zhì)免疫印跡檢測結(jié)果顯示,MAEL和Bcl-2的蛋白
3、表達量顯著降低(p<0.05);E-鈣黏蛋白和Caspas-3蛋白的表達量顯著升高(p<0.05)。細胞增殖能力和劃痕愈合率顯著降低(p<0.05),穿過基底膜的HepG2細胞個數(shù)顯著減少(p<0.05),并且聯(lián)合轉(zhuǎn)染對細胞的增殖、遷移和侵襲的抑制效果更佳(p<0.05)。
結(jié)論:siRNA-778能有效下調(diào)MAEL基因的表達,saRNA-215有效上調(diào)CDH1基因的表達;HepG2細胞的遷移和侵襲能力降低、增殖減少,這些現(xiàn)象
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