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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
比較靜電動(dòng)態(tài)液體紡紗法制備的大孔徑、高孔隙率的TPU/P(LLA-CL)微米紗支架和傳統(tǒng)靜電紡絲制備的TPU/P(LLA-CL)納米纖維支架的表征,包括兩種支架的表面形貌、力學(xué)性能等;研究?jī)煞N支架材料與兔脂肪干細(xì)胞構(gòu)建女性盆底組織工程網(wǎng)片的生物相容性。
研究方法:
1、TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米纖維支架的制備和表征測(cè)試:將TPU/P(LLA-CL)按照質(zhì)量比例為100/0,75/25
2、,50/50,25/75,0/100溶解于六氟異丙醇,分別采用靜電動(dòng)態(tài)液體紡紗技術(shù)制備復(fù)合微米紗支架、傳統(tǒng)靜電紡絲技術(shù)制備復(fù)合納米纖維支架;應(yīng)用掃描電子顯微鏡觀察兩種支架的形貌,計(jì)算兩種支架材料的纖維直徑、孔隙率和孔徑的大?。粦?yīng)用萬(wàn)能材料測(cè)試機(jī)檢測(cè)兩種支架的力學(xué)性能;應(yīng)用傅里葉紅外光譜分析不同比例的支架材料的表面化學(xué)性能。
2、TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米纖維支架復(fù)合兔脂肪干細(xì)胞構(gòu)建盆底組織工程補(bǔ)片:分離兔脂肪干細(xì)胞
3、,慢病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染EGFP對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記;將每種支架制備成0.5cm×0.5cm大小的樣本,共分為微米紗、納米纖維和對(duì)照組三組(n=3);將兔脂肪干細(xì)胞接種在三組的樣本上,通過(guò)掃描電子顯微鏡、倒置熒光顯微鏡、CCK-8實(shí)驗(yàn)法等方法檢測(cè)兔脂肪干細(xì)胞在兩種支架表面的黏附、生長(zhǎng)和增殖情況;組織學(xué)切片HE染色分析細(xì)胞長(zhǎng)入支架的情況。
研究結(jié)果:
1、微米紗粗細(xì)不均,表面粗糙,納米纖維支架的纖維粗細(xì)均勻,表面光滑;微米紗的平均直
4、徑約為14.05±2.21μm,納米纖維的平均直徑約為1.132±0.18μm,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P?0.05);微米紗支架的平均孔徑(550.78±142.60μm2)明顯大于納米纖維支架(69.05±19.18μm2),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);微米紗支架孔隙率(79.09±3.22%)明顯高于納米纖維支架(61.8±1.64%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同一種質(zhì)量比例的TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米
5、纖維支架力學(xué)性能差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。微米紗支架,TPU/P(LLA-CL)為50/50時(shí)斷裂應(yīng)力最大(11.5±3.43Mpa),與天然陰道壁組織力學(xué)性能最接近。五種不同比例的納米纖維支架,隨著TPU比例的增加,斷裂應(yīng)力隨之增大。微米紗支架和納米纖維支架表面TPU和P(LLA-CL)沒(méi)有發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
2、CCK-8試驗(yàn)顯示接種細(xì)胞1d后,三組之間吸光度值無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.806);接種細(xì)胞后
6、4d,微米紗支架上的吸光度值大于納米纖維支架和空白板的吸光度值,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.083),隨著培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)間的延長(zhǎng),三組在接種細(xì)胞7d后的吸光度值均高于其1d和4d的吸光度值;在接種細(xì)胞7d時(shí),納米纖維支架組與對(duì)照組之間吸光度值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),微米紗支架與納米纖維支架之間,微米紗支架與對(duì)照組之間的差異性均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。根據(jù)HE染色結(jié)果分析得到細(xì)胞接種1d、4d和7d后,ADSCs長(zhǎng)入納米纖
7、維支架的平均深度分別為(36.50?3.08μm、37.06?2.23μm和40.17?4.96μm),第1d和4d(P=0.06)、4d和7d(P=0.06)、1d和7d(P=0.22)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ADSCs長(zhǎng)入微米紗支架的平均深度分別為250.00?33.62μm,350.90?38.92μm和449.01?51.73μm,第1d和4d(P<0.05)、4d和7d(P<0.05)、1d和7d(P<0.05)之間差異均具有統(tǒng)
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