標定了花藥特異啟動子的tritordeum的篩選及遺傳分析.pdf

1、外源基因定位表達的實現(xiàn)，依賴于啟動子的合理調(diào)控，特別是一些花藥組織特異性啟動子，是創(chuàng)造作物雄性不育系及恢復(fù)系的關(guān)鍵因素。本論文從一批使用無啟動子uidA轉(zhuǎn)化策略轉(zhuǎn)化的tritordeum中，分離出了標定有花藥組織特異性啟動子的單株并考察了其外源基因的遺傳穩(wěn)定性，為即將開展的啟動子分離工作奠定了準確堅實的基礎(chǔ)，取得了如下結(jié)果： 1）對轉(zhuǎn)基因材料不同生長時期的不同組織進行Gus組織化學(xué)檢測，分析了植株中Gus表達的時空特異性，應(yīng)用R

2、T-PCR從轉(zhuǎn)錄水平進一步確證了啟動子的特異性，所篩選出的單株中，Gus的表達特異性和T0代表現(xiàn)完全一樣，只限于花藥原基和花粉粒部位。 2）整合位點在各代之間傳遞的頻率較低，即絕大部分子代中外源Gus拷貝發(fā)生完全缺失，明顯不符合顯性：隱性（3:1）規(guī)律，但Gus的表達特異性在各代之間傳遞時有著極強的遺傳穩(wěn)定性，這說明了此轉(zhuǎn)基因麥類雖然經(jīng)歷了多次傳代，但其內(nèi)源性啟動子的結(jié)構(gòu)完整、功能正常。 3）外源基因插入到作物內(nèi)源啟動子