海藻酸鈉水凝膠用于神經(jīng)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的研究.pdf

1、中樞神經(jīng)難以再生使得中樞系統(tǒng)損傷疾病嚴(yán)重影響著人類(lèi)的健康，干細(xì)胞具有自我更新和分化為多種細(xì)胞的潛能為治療中樞神經(jīng)損傷性疾病提供了新的治療方案。然而干細(xì)胞移植面臨著成活率低和有效分化率低的難題。本課題針對(duì)干細(xì)胞移植的兩大難題，研究了兩套神經(jīng)干細(xì)胞三維移植的水凝膠系統(tǒng)，從多個(gè)方面解決干細(xì)胞移植問(wèn)題。
　　制備不同氧化度的部分氧化的海藻酸鈉，利用部分氧化的海藻酸鈉與明膠形成可注射的水凝膠，通過(guò)顯微形貌、流變力學(xué)進(jìn)行篩選，并對(duì)篩選的低氧化

2、度部分氧化海藻酸鈉水凝膠材料進(jìn)行生物相容性測(cè)試。并結(jié)合包覆小分子藥物TWS119的明膠納米微球形成生物活性復(fù)合水凝膠，并制作不同載藥梯度進(jìn)行測(cè)試對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化作用，結(jié)果表明可定向誘導(dǎo)90％左右向神經(jīng)元分化。生物活性復(fù)合水凝膠系統(tǒng)可以提高移植細(xì)胞的成活率和有效分化率，但無(wú)法誘導(dǎo)分化為多巴胺能神經(jīng)元，尤其是針對(duì)帕金森作用的A9多巴胺能神經(jīng)元。
　　針對(duì)帕金森疾病A9多巴胺能神經(jīng)元的缺乏和干胞移植的兩大難題，課題設(shè)計(jì)了雙層智能水凝

3、膠系統(tǒng)，課題研究了神經(jīng)球的定向誘導(dǎo)分化水凝膠并作為雙層系統(tǒng)的外層，并制備了促進(jìn)細(xì)胞增殖、粘附和細(xì)胞遷移一體的智能水凝膠材料作為雙層系統(tǒng)的內(nèi)核。外層分化層固定化Cripto-1封閉性抗體可實(shí)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元尤其A9多巴胺能神經(jīng)元分化，并形成神經(jīng)元的網(wǎng)絡(luò)。內(nèi)層材料接枝RGD多肽促進(jìn)了神經(jīng)干細(xì)胞增殖、粘附，根據(jù)細(xì)胞增殖情況和MMP分泌情況接枝MMP底物促進(jìn)細(xì)胞遷移躲避炎癥反應(yīng)高發(fā)期，炎癥反應(yīng)高發(fā)期后細(xì)胞遷移至外層被誘導(dǎo)分化，從而行