小鼠和山羊胚胎干細(xì)胞建系及其分化為神經(jīng)元細(xì)胞的基礎(chǔ)研究.pdf

1、分類號(hào)單位代碼學(xué)號(hào)必獷另蓉博士學(xué)位論文肋朋故切如已妙加’歷盯’朋論文題目刁、鼠和山羊胚胎干細(xì)胞建系及其分化為神經(jīng)元細(xì)胞的基礎(chǔ)研究者姓名田海濱發(fā)，藝二月生物學(xué)作專指導(dǎo)教師姓名…自增亮專業(yè)技術(shù)職務(wù)教授年月日山東大學(xué)博士學(xué)位論文小鼠和山羊胚胎干細(xì)胞建系及其分化為神經(jīng)元細(xì)胞的基礎(chǔ)研究摘要小鼠胚胎干細(xì)胞汀，分離建系的成功是發(fā)育生物學(xué)研究中的一個(gè)里程碑，而人類分離培養(yǎng)的成功進(jìn)一步激發(fā)了科研人員對(duì)進(jìn)行研究的熱情。不僅可作為基因載體用于構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，

2、研究單基因功能，而且其廣泛的分化能力以及體外可大量增殖的能力使其具備了用于細(xì)胞移植治療人類疾病的潛能。如體外分化成神經(jīng)元細(xì)胞，用于治療神經(jīng)退行性疾病。特別是隨著治療性克隆研究取得成功，使這一設(shè)想成為可能。然而，的有效分離培養(yǎng)以及體外高效分化成所需類型的功能細(xì)胞這兩大關(guān)鍵問題直接影響將用于細(xì)胞移植治療人類疾病的研究。本文基于這兩大關(guān)鍵問題，開展了小鼠和山羊的建系和體外分化成神經(jīng)元細(xì)胞的研究，以期優(yōu)化的分離培養(yǎng)體系，提高建系效率。并探討將高

3、效分化成神經(jīng)元細(xì)胞的新方法，為通過細(xì)胞移植治療神經(jīng)退行性疾病的研究奠定基礎(chǔ)。首先，以小鼠囊胚為材料進(jìn)行小鼠的分離培養(yǎng)。成功從天的小鼠囊胚分離獲得一株細(xì)胞系。體外培養(yǎng)傳代超過代仍保持未分化狀態(tài)核型為正常型堿性磷酸酶及一基因高表達(dá)懸浮培養(yǎng)可以生成擬胚體仃，接種到裸鼠皮下可形成畸胎瘤注射到小鼠天囊胚中，可以參與胚胎發(fā)育并產(chǎn)生嵌合體小鼠。研究結(jié)果證實(shí)，分離獲得的小鼠具有發(fā)育的多能性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)分離獲得的小鼠的增殖需要白血病抑制因子仃，和飼養(yǎng)