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文檔簡介
1、目的:
探討PIN對低氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的大鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。
方法:
將大鼠肝細(xì)胞(BRL-3A細(xì)胞系)分為正常對照組、PIN實(shí)驗(yàn)組、低氧復(fù)氧損傷模型組和PIN預(yù)處理組。CCK-8檢測細(xì)胞存活率;Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡;檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中ALT活性;ELISA檢測TNF-α和IL-1β含量;細(xì)胞中TLR4、IκB-α和NF-κB p65蛋白水平通過Weste
2、rn blot檢測;細(xì)胞中TLR4、IκB-α和NF-κB p65mRNA表達(dá)通過RT-qPCR檢測。
結(jié)果:
在H/R條件下細(xì)胞存活率明顯降低(P<0.01),細(xì)胞凋亡率增高(P<0.001),ALT活性升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α含量增多(P<0.01),TLR4和NF-κB p65蛋白與mRNA表達(dá)水平顯著提高(P<0.01)而IκB-α降低(P<0.05);經(jīng)PIN預(yù)處理后,細(xì)胞存活率顯著提高
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