養(yǎng)真接骨膠囊的制備工藝及質量標準研究.pdf

1、目的:養(yǎng)真接骨膠囊由骨碎補、續(xù)斷、川芎、自然銅、黃瓜子、乳香、沒藥、土鱉蟲、紅花和制川烏等十味中藥組成,具有補益肝腎、強筋壯骨、行氣活血、消腫止痛的功效,能加速成骨,促進骨愈合,用于治療骨折等癥,具有確切的療效,但是缺乏全面的質量控制方法,本研究以2010版藥典為依據,建立處方中續(xù)斷、乳香、土鱉蟲和川芎四味藥的薄層鑒別方法,烏頭堿的限量檢查及柚皮苷和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量測定方法,以完善養(yǎng)真接骨膠囊的質量控制標準。
　　 方法:

2、r>　　 1.制備工藝研究
　　 1.1粉碎工藝為避免有效成分流失,保證藥效,經查閱相關文獻,將部分黃瓜子、部分骨碎補、自然銅、土鱉蟲、川芎粉碎成細粉入藥。
　　 1.2水煎工藝選用L9(3)4正交表安排實驗,以出膏率為考察指標,以加水量、提取時間、提取次數為考察因素,優(yōu)選提取工藝。
　　 1.2.1出膏率測定按處方量5倍稱取藥物,按優(yōu)選的水煎方法提取、精制,濃縮,干燥,精密稱定重量,計算出膏率。
　　

3、 1.3中試研究按照確定的工藝路線,中試生產3批樣品,并對3批中試成品進行了檢測。
　　 2.質量標準研究以規(guī)范的制備工藝加工制成的養(yǎng)真接骨膠囊為研究對象,從薄層鑒別和含量測定方面進行研究,建立和完善養(yǎng)真接骨膠囊的質量標準。
　　 2.1薄層鑒別方法采用薄層色譜法,分別對供試品溶液的制各方法、展開劑系統(tǒng)、檢視方法等條件進行優(yōu)化,對處方中續(xù)斷、乳香、土鱉蟲和川芎等四味中藥進行了薄層鑒別研究。
　　 2.2限量檢查采

4、用薄層色譜法,對處方中對烏頭堿進行了限量檢查。
　　 2.3含量測定方法建立HPLC法測定養(yǎng)真接骨膠囊中柚皮苷和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量的方法,并進行方法學研究。結果:
　　 1.制劑工藝研究結果
　　 1.1粉碎工藝優(yōu)選工藝為:將部分黃瓜子、部分骨碎補、自然銅、土鱉蟲、川芎烘干研細過100目篩。
　　 1.2水煎工藝
　　 1.2.1水煎工藝優(yōu)選工藝為:取部分黃瓜子、部分骨碎補、制川烏、乳香、沒藥、續(xù)斷

5、、紅花,置夾層鍋內加水煎煮兩次,第一次加水8倍,煎煮1小時;第二次加水6倍,煎煮40分鐘,合并提取液,濾過,選用多效濃縮器進行濃縮至相對密度1.25(90℃)左右,常壓濃縮。
　　 1.2.2出膏率測定照制備工藝方法進行煎煮提取,考察有效成分是否浸出,結果顯示本工藝平均出膏率為10.0％。
　　 1.3制備工藝研究制劑工藝為:將部分黃瓜子、部分骨碎補、自然銅、土鱉蟲、川芎烘干研細過100目篩;取部分黃瓜子、部分骨碎補、制

6、川烏、乳香、沒藥、續(xù)斷、紅花,置夾層鍋內加水煎煮兩次,第一次加水8倍,煎煮1小時,第二次加水6倍,煎煮40分鐘,合并提取液,濾過,濃縮至相對密度1.25(90℃)左右,常壓濃縮;以黃瓜子、自然銅等藥材的細粉收清膏,烘干;烘干后的清膏粉碎成細粉,裝入空心膠囊,即得。
　　 三批中試試驗結果表明本制備工藝平均成品率為99.33%,試驗結果表明制定的制劑工藝是穩(wěn)定可行的。
　　 2.質量標準研究
　　 2.1薄層鑒別<

7、br>　　 建立了成品中續(xù)斷、乳香、土鱉蟲和川芎4味藥的薄層鑒別方法。試驗表明,方法專屬性、重現性良好,在供試品色譜中,與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的主斑點,可以證明養(yǎng)真接骨膠囊中續(xù)斷、乳香、土鱉蟲和川芎的存在。
　　 2.2限量檢查
　　 以烏頭堿對照品作為對照,在供試品色譜中,與對照品色譜相應的位置上,供試品烏頭堿斑點含量小于對照品,符合要求。
　　 2.3高效液相色譜法測定柚皮苷的含量
　

8、　 采用反相高效液相色譜法建立了成品中柚皮苷的含量測定方法。方法學試驗表明,本方法專屬性良好,柚皮苷在濃度為300-1800μg/mL范圍內呈良好線性關系,回歸方程為y=2334.8x+917l,相關系數r=0.9999;精密度試驗對照品RSD為0.30%,供試品RSD為0.33%;穩(wěn)定性試驗表明柚皮苷在24 h內峰面積穩(wěn)定,對照品RSD為0.27%,供試品RSD為0.41%;重復性試驗RSD為0.95%;平均回收率為98.06%,R

9、SD為4.08%。
　　 2.4高效液相色譜法測定川斷皂苷Ⅵ的含量
　　 采用反相高效液相色譜法建立了成品中川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量測定方法。方法學試驗表明,本方法專屬性良好,川續(xù)斷皂苷Ⅵ在濃度為400-2400μg/mL范圍內呈良好線性關系,回歸方程為y=2407.5x+12609,相關系數r=0.9999;精密度試驗對照品RSD為0.37%,供試品RSD為0.72%;穩(wěn)定性試驗表明川續(xù)斷皂苷Ⅵ在24 h內峰面積穩(wěn)定,對照品