脊髓壓迫性損傷神經(jīng)纖維潰變及其機制初步探討.pdf

1、目的：研究脊髓壓迫性損傷(compression spinal cord injury，CSCI)脊髓白質(zhì)神經(jīng)纖維潰變的時空規(guī)律；觀察CSCI中髓鞘蛋白MBP表達及少突膠質(zhì)細胞凋亡變化，以對CSCI神經(jīng)纖維潰變機制進行初步探討。
　　方法：
　　1.利用課題組自行設(shè)計的大鼠壓迫器制作大鼠脊髓壓迫模型；70只成年SD大鼠隨機分成三組，分別為模型組、假手術(shù)組和正常組。假手術(shù)組大鼠組僅手術(shù)不做壓迫，正常組不做任何處理。
　　

2、2.采用HE、LFB和透射電鏡觀察壓迫后脊髓神經(jīng)纖維形態(tài)變化；免疫熒光和Western blot檢測壓迫后蛋白MBP表達變化；TUNEL和APC免疫熒光雙標法檢測少突膠質(zhì)細胞凋亡。
　　結(jié)果：
　　1.HE染色顯示，脊髓受壓7d后，白質(zhì)纖維明顯腫脹，軸突間隙增寬，呈疏網(wǎng)狀改變；LFB染色顯示，脊髓受壓后，白質(zhì)神經(jīng)纖維髓鞘腫脹，間隙增寬的同時，髓鞘化纖維數(shù)隨著壓迫時間延長進行性減少，以腹側(cè)索變化最為明顯；透射電鏡顯示，脊髓受壓

3、迫脊髓受壓7d后，神經(jīng)纖維軸突腫脹，髓鞘板層分離斷裂缺失。
　　2.MBP免疫熒光顯示MBP陽性纖維隨著壓迫時間逐漸缺失，Western blot結(jié)果顯示，蛋白MBP隨著壓迫時間推移進行性下降，壓迫1d、3d和7d后相對吸光度值分別為：0.76±0.15，0.65±0.14，0.26±0.02。
　　3.TUNEL檢測發(fā)現(xiàn)脊髓受壓中少突膠質(zhì)細胞呈現(xiàn)凋亡，凋亡的少突膠質(zhì)細胞主要分布于白質(zhì)；隨著壓迫時間推移，其凋亡數(shù)量逐漸增加。