雞組織中泰拉霉素殘留檢測的LC-MS-MS法及體內(nèi)應(yīng)用評價.pdf

1、泰拉霉素作為新型獸醫(yī)專用的大環(huán)內(nèi)酯類藥物以其給藥后吸收迅速、生物利用度高等特點(diǎn)而被廣泛用于臨床。藥物使用可能會在動物源性食品內(nèi)殘留，從而通過食物鏈危害人體健康。本文建立了血漿、雞肉、肝臟和腎臟中泰拉霉素藥物殘留的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）檢測法，進(jìn)一步研究該藥物在雞體內(nèi)藥代動力學(xué)規(guī)律及其安全性。
　　血漿樣品加入乙腈，混勻后直接離心，組織樣品經(jīng)乙腈提取，正己烷去脂，LC-SCX柱凈化，5％氨水甲醇溶液洗脫，以Lun

2、a C18（2）色譜柱分離，用乙腈和0.1%甲酸水溶液為流動相進(jìn)行等度洗脫，電噴霧正離子模式（ ESI+）電離，多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果顯示：泰拉霉素在2～200μg/kg(μg/L)的范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.9900。泰拉霉素在血漿、肌肉、肝臟、腎臟樣品中的檢出限依次為0.8、0.5、0.8、0.5μg/kg(μg/L)，定量限依次為2.0、1.0、2.0、1.0μg/kg(μg/L)。日內(nèi)RSD為

3、5.0%～9.2%；日間相RSD為5.2%～12.7%。該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于雞組織中泰拉霉素藥物殘留的確證和定量檢測。雞單劑量靜注、肌注及內(nèi)服給藥后，定時采集血漿、肌肉、肝臟、腎臟，用建立的LC-MS/MS法進(jìn)行測定，采用WinNonlin非房室模型分析方法。非房室模型的分析表明：靜脈注射給藥后，血漿清除率(CL)為17.71 mL/kg/h，穩(wěn)態(tài)表觀分布容積(Vss)為77.15 L/kg，消除半衰期(t1/2)為21.65

4、 h。肌肉注射和內(nèi)服泰拉霉素后，分別在0.25 h和0.5 h，血漿濃度達(dá)峰值， Cmax分別為0.83 ng/mL、0.69 ng/mL，血漿中平均消除半衰期分別為20.96 h、24.33 h。生物利用度分別為92.5%、62.38%。
　　30只健康羅曼雞給藥前臨床表現(xiàn)正常，未觀察到異常反應(yīng)。泰拉霉素治療劑量組（20 mg/kg.b.w）、3倍治療劑量組（60 mg/kg.b.w）和5倍治療劑量組（100 mg/kg.b.w

5、）的給藥后進(jìn)行臨床觀察、增重率、臟器系數(shù)、生化指標(biāo)、病理組織學(xué)鑒定5項(xiàng)安全性試驗(yàn)指標(biāo)的測定。分析結(jié)果表明泰拉霉素各給藥組的雞臨床表現(xiàn)正常，無任何不良反應(yīng)；不同治療劑量組體重平均增重率與對照組組之間均無顯著性差異（P>0.05）；各臟器質(zhì)量及臟器指數(shù)與對照組相比差異不顯著（P>0.05）；血清生理生化指標(biāo)檢測發(fā)現(xiàn)，在給藥至第7天BUN和CREA有暫時性的減少，隨后恢復(fù)正常。泰拉霉素各給藥組的ALB、TP、GOP和GPT與空白組比較差異均不