牛可食性組織25種喹諾酮類藥物L(fēng)C-MS-MS檢測方法研究.pdf

1、學(xué)校代碼：10564學(xué)號：2014307327分類號：S859.7密級：碩士學(xué)位論文?？墒承越M織25種喹諾酮類藥物L(fēng)CMSMS檢測方法研究權(quán)丹第一指導(dǎo)教師：第一指導(dǎo)教師：陳紅高級獸醫(yī)師第二指導(dǎo)教師：第二指導(dǎo)教師：學(xué)院名學(xué)院名稱：獸醫(yī)學(xué)院專業(yè)學(xué)位類別：專業(yè)學(xué)位類別：獸醫(yī)碩士領(lǐng)域：域：無答辯委員會主席：答辯委員會主席：曾振靈教授中國廣州2016年6月摘要喹諾酮類藥物是一類人工合成的抗菌藥物，因其具有抗菌譜廣、殺菌力強(qiáng)、使用方便、價(jià)格低廉等優(yōu)

2、點(diǎn)而在獸醫(yī)臨床上被廣泛應(yīng)用。近年來，隨著對該類藥物應(yīng)用的增加，濫用、不遵守休藥期等現(xiàn)象日益增多，隨之而來的殘留問題也日益嚴(yán)重。我國農(nóng)業(yè)部已規(guī)定了部分該類藥物在動物性食品中的最高殘留限量(MRLs)。本研究建立了25種喹諾酮類藥物（包括吡哌酸、恩諾沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、馬波沙星、培氟沙星、氟甲喹、二氟沙星、洛美沙星、帕珠沙星、達(dá)氟沙星、依諾沙星、氟羅沙星、諾氟沙星、西諾沙星、沙拉沙星、司帕沙星、噁喹酸、萘啶酸、莫西沙星、加替沙星、奧比

3、沙星、那氟沙星、安妥沙星和巴洛沙星）在牛的可食性組織（包括肝臟、腎臟、肌肉、脂肪、牛奶）中的HPLCMSMS多殘留檢測方法，以期完善我國動物性食品中喹諾酮類藥物的多殘留檢測方法。樣品用1%甲酸乙腈甲醇(95:5VV)溶液提取兩次，合并兩次提取的上清液，定容后充分混合均勻，移取2mL提取液，用乙腈飽和的正己烷除去其中的脂溶性雜質(zhì)，經(jīng)氮?dú)鈸]干，用1mL0.1%甲酸水甲醇(95:5VV)溶解殘?jiān)?，渦旋、超聲后再經(jīng)兩次高速離心去除雜質(zhì)，過0.2

4、2m有機(jī)濾膜。用0.1%甲酸水乙腈體系作為流動相，梯度洗脫，以LunaC18色譜柱進(jìn)行分離，在正離子模式下用LCMSMS法進(jìn)行分析檢測。在本方法下，25種喹諾酮類藥物的峰面積與濃度在線性范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.99。同時，在低、中、高三個濃度水平做添加實(shí)驗(yàn)，所得平均回收率除安妥沙星在腎臟及肌肉中的較低（分別為51.9%~71.7%和56.2%~68.3%）外，其余回收率為62.7%~116.0%，批內(nèi)變異系數(shù)為0.1

5、%~14.4%，批間變異系數(shù)為1.0%~16.0%，滿足痕量分析的要求。方法所得25種喹諾酮類藥物的檢測限(LOD)和定量限(LOQ)分別為：在牛肌肉、肝臟、腎臟組織中的LOD和LOQ分別是0.2~1.0gkg和0.5~2.0gkg；在牛脂肪組織中的LOD和LOQ分別是0.1~1.0gkg和0.5~2.0gkg；在牛奶中的LOD和LOQ分別是0.1~1.0gkg和0.2~2.0gkg。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本研究所建立的LCMSMS檢測25種喹