三氧化二砷對小鼠腎臟的影響.pdf

1、砷暴露或過量吸收能導(dǎo)致多種疾病和病理損傷。砷化物對子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的直接影響研究較少。本文第一部分旨在研究三氧化二砷（Arsenic Trioxide，ATO）暴露對雄性小鼠腎臟的影響。包括：ATO暴露對雄性小鼠腎臟生化指標(biāo)-血清肌酐與尿素氮含量、腎臟系數(shù)、腎臟組織形態(tài)的影響；對雄性小鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響；腎臟氧化應(yīng)激與甲硫氨酸亞砜還原酶基因表達(dá)的關(guān)系。第二部分旨在研究三氧化二砷對人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及增殖活力的影響，人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)

2、胞對ATO的敏感性，為三氧化二砷的類激素樣作用做出初步探索。實(shí)驗(yàn)將SPF級的性成熟CD-1品系雄性小鼠隨機(jī)分成六組，每組7只，采取頸部皮下注射As2O3的方法，注射濃度分別為0.0mg/kg、、0.3mg/kg、1.0mg/kg、3.0mg/kg、6.0mg/kg和9.0 mg/kg每組。連續(xù)注射5天，休息2天，持續(xù)3周，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。第一部分方法：檢測和統(tǒng)計(jì)各組雄性小鼠腎臟生化指標(biāo)-血清肌酐與尿素氮含量、腎臟系數(shù)、腎臟組織形態(tài)的變化；

3、試劑盒檢測各組雄性小鼠腎臟組織超氧化物歧化酶SOD（Superoxide Dismutase，SOD）活性和MDA（Malondialdehyde，MDA）含量；研究甲硫氨酸亞砜還原酶Msr（Methionine Sulfoxide Reductase，Msr）作為一種重要的抗氧化酶，在ATO暴露的雄性小鼠腎臟中的變化情況，設(shè)計(jì)4種甲硫氨酸亞砜還原酶基因MsrA、MsrB1、MsrB2和MsrB3的引物，對腎臟總RNA進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量P

4、CR，并將結(jié)果與氧化應(yīng)激的結(jié)果橫向比較。第二部分方法：培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞貼壁生長，進(jìn)入指數(shù)生長期后，加入As2O3濃度為1.0μmol/L、2.0μmol/L、3.0μmol/L、4.0μmol/L和5.0μmol/L每組，以不加As2O3的培養(yǎng)細(xì)胞為空白對照組。顯微鏡檢測細(xì)胞攻毒48小時(shí)后的生長形態(tài)、測定細(xì)胞活力曲線。結(jié)果顯示，不同劑量ATO處理的雄性小鼠血清肌酐和尿素含量有下降；小鼠體重和腎臟系數(shù)無顯著影響；高劑量組對腎臟組織構(gòu)

5、成損害。小鼠腎臟膜脂過氧化水平?jīng)]有顯著影響，ATO處理誘導(dǎo)了SOD活性的增加，但9.0 mg/kg劑量組SOD活性顯著降低；不同Msr基因?qū)TO處理表現(xiàn)出差異性反應(yīng)，MsrA、MsrB3基因表達(dá)不受影響，ATO處理后MsrB1基因的表達(dá)顯著下調(diào)，而高劑量的ATO則顯著上調(diào)了MsrB2基因的表達(dá)。不同劑量ATO處理的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的影響是低劑量促進(jìn)生長，高劑量抑制生長，并對細(xì)胞有損傷。結(jié)論：砷暴露對小鼠的腎臟組織的損害呈現(xiàn)劑量依賴性