丙泊酚對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的小鼠腎小球系膜細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：本文旨在通過(guò)用脂多糖刺激小鼠腎小球系膜細(xì)胞來(lái)研究丙泊酚對(duì)脂多糖刺激的腎小球系膜細(xì)胞的增殖、凋亡及分泌NO的影響。
　　方法：實(shí)驗(yàn)采用的是小鼠腎小球系膜細(xì)胞（SV40MES13），當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)至3-5代時(shí)，常規(guī)消化收集細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，均勻種植在兩塊48孔板和一塊96孔板上。將細(xì)胞分為8組，即空白對(duì)照組、丙泊酚組（5,10,20μg/ml)、脂多糖組（10μg/ml）和脂多糖（10μg/ml）+丙泊酚（5,10,20μg/ml

2、）組，每組各設(shè)6個(gè)復(fù)孔。按照以上分組向各個(gè)孔內(nèi)添加不同藥物刺激，脂多糖（10μg/ml）+丙泊酚（5,10,20μg/ml）組需在添加脂多糖1小時(shí)后再加入不同劑量的丙泊酚。最后將細(xì)胞放入CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況并照相，并通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖程度；收集各孔細(xì)胞培養(yǎng)基用于ELISA法檢測(cè)細(xì)胞分泌NO的情況，并消化收集各孔細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)分析細(xì)胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：1倒置顯微鏡下

3、觀察，脂多糖組細(xì)胞數(shù)量明顯多于空白對(duì)照組與單純丙泊酚組，且細(xì)胞均由不規(guī)則形變成圓形；脂多糖+丙泊酚（10,20μg/ml）組細(xì)胞數(shù)量較脂多糖組明顯減少，并有部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡或懸浮，而脂多糖+丙泊酚5μg/ml組細(xì)胞較脂多糖組變化不明顯。2與空白對(duì)照組相比，單純丙泊酚（5,10,20μg/ml）組細(xì)胞的增殖程度、凋亡率和NO分泌情況均沒(méi)有明顯變化（P>0.05）,脂多糖組細(xì)胞的增殖程度及NO的分泌均顯著升高,而凋亡率降低（P<0.05）；

4、在脂多糖處理后再加入中、高濃度丙泊酚（10,20μg/ml）均可導(dǎo)致細(xì)胞的增殖程度減弱, NO的分泌減少,細(xì)胞凋亡率有所增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,并且差異在脂多糖+丙泊酚20μg/ml組中更明顯，而在脂多糖處理后再加入低濃度（5μg/ml）的丙泊酚則沒(méi)有明顯變化（P>0.05）。
　　結(jié)論：1低、中、高濃度的丙泊酚（5,10,20μg/ml）對(duì)正常小鼠腎小球系膜細(xì)胞的增殖、凋亡及NO的分泌均沒(méi)有明顯影響。2中、高濃度