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文檔簡介
1、目的:探討內(nèi)脂素對大鼠腎小球系膜細(xì)胞株(HBZY-1)纖維連接蛋白(fibronectin,FN)與Ⅰ型膠原(typeⅠcollagen,COLⅠ)表達(dá)的影響及其可能的作用機(jī)制。
方法:體外培養(yǎng)HBZY-1,采用不同濃度內(nèi)脂素作用HBZY-1或同一濃度內(nèi)脂素作用HBZY-1不同時(shí)間,并應(yīng)用P38MAPK特異性抑制劑SB203580作用HBZY-1,以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測FN和COLⅠmRNA表達(dá)水平,免疫印跡法檢測FN、C
2、OLⅠ蛋白及磷酸化P38MAPK蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)不同濃度內(nèi)脂素作用HBZY-124h,細(xì)胞FNmRNA和蛋白表達(dá)均明顯增高(P<0.05),從25ng/ml濃度開始,隨著內(nèi)脂素濃度增加,FNmRNA和蛋白表達(dá)均逐漸增加,在濃度為100ng/ml時(shí)表達(dá)量最高;(2)100ng/ml內(nèi)脂素作用HBZY-1不同時(shí)間,細(xì)胞FNmRNA和蛋白表達(dá)均明顯增高(P<0.05),從12h開始,隨著作用時(shí)間延長,FNmRNA和蛋白表
3、達(dá)均逐漸增加,在24h時(shí)表達(dá)量最高;(3)不同濃度內(nèi)脂素作用HBZY-124h,細(xì)胞COLⅠmRNA和蛋白表達(dá)均明顯增高(P<0.05),在25-200ng/ml范圍內(nèi),隨著內(nèi)脂素濃度增加,COLⅠmRNA和蛋白表達(dá)均逐漸增加;(4)100ng/ml內(nèi)脂素作用HBZY-1不同時(shí)間,細(xì)胞COLⅠmRNA和蛋白表達(dá)均明顯增高(P<0.05),在12-48h范圍內(nèi),隨著作用時(shí)間延長,COLⅠmRNA和蛋白表達(dá)均逐漸增加;(5)內(nèi)脂素促進(jìn)磷酸化
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