通過反轉(zhuǎn)錄病毒侵染建立穩(wěn)定過表達(dá)c-Myc的MIN6細(xì)胞系.pdf

1、c-Myc為原癌基因,為正常組織器官發(fā)育過程中所必需。它主要通過特異或非特異性與靶基因DNA結(jié)合位點(diǎn)相結(jié)合,啟動(dòng)或抑制靶基因的表達(dá),調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化等生命活動(dòng)。有研究發(fā)現(xiàn),c-Myc基因在染色體上發(fā)生擴(kuò)增或激活突變會(huì)引起細(xì)胞增殖加快,細(xì)胞侵襲能力加強(qiáng),導(dǎo)致胰腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及惡化；在β細(xì)胞中過表達(dá)c-Myc也可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,減少β細(xì)胞群體數(shù)量。為了進(jìn)一步研究c-Myc對于β細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制,本研究通過用293GP細(xì)胞包裝帶有c-Myc

2、基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,制備假性逆轉(zhuǎn)錄病毒,用其侵染胰腺β細(xì)胞系MIN6。通過對整合c-Myc基因的MIN6細(xì)胞G418篩選、擴(kuò)增獲得穩(wěn)定過表達(dá)c-Myc基因的MIN6細(xì)胞克隆,并進(jìn)一步分析c-Myc過表達(dá)引起MIN6細(xì)胞的生命活動(dòng)變化。
　　 結(jié)果表明,通過抗性藥物G418的篩選,獲得整合逆轉(zhuǎn)錄病毒基因的多個(gè)MIN6細(xì)胞克?。籖T-PCR檢測結(jié)果表明,這些細(xì)胞能穩(wěn)定過表達(dá)c-Myc基因,同時(shí)發(fā)現(xiàn),在過表達(dá)c-Myc的MIN6細(xì)胞