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文檔簡介
1、c-Myc為原癌基因,為正常組織器官發(fā)育過程中所必需。它主要通過特異或非特異性與靶基因DNA結(jié)合位點相結(jié)合,啟動或抑制靶基因的表達,調(diào)節(jié)細胞生長、分化等生命活動。有研究發(fā)現(xiàn),c-Myc基因在染色體上發(fā)生擴增或激活突變會引起細胞增殖加快,細胞侵襲能力加強,導(dǎo)致胰腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及惡化;在β細胞中過表達c-Myc也可誘導(dǎo)細胞凋亡,減少β細胞群體數(shù)量。為了進一步研究c-Myc對于β細胞的調(diào)控機制,本研究通過用293GP細胞包裝帶有c-Myc
2、基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,制備假性逆轉(zhuǎn)錄病毒,用其侵染胰腺β細胞系MIN6。通過對整合c-Myc基因的MIN6細胞G418篩選、擴增獲得穩(wěn)定過表達c-Myc基因的MIN6細胞克隆,并進一步分析c-Myc過表達引起MIN6細胞的生命活動變化。
結(jié)果表明,通過抗性藥物G418的篩選,獲得整合逆轉(zhuǎn)錄病毒基因的多個MIN6細胞克??;RT-PCR檢測結(jié)果表明,這些細胞能穩(wěn)定過表達c-Myc基因,同時發(fā)現(xiàn),在過表達c-Myc的MIN6細胞
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