根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)WIN1基因在甘藍(lán)型油菜中的轉(zhuǎn)化.pdf

1、油菜是世界上比較古老的油料作物,也是我國種植面積最大的油料作物,在中國和印度等地具有悠久的種植歷史。目前油菜已成為世界上四大油料作物(大豆、向日葵、油菜、花生)之一,20世紀(jì)80年代以來,油菜作為重要的植物油源和飼料源,發(fā)展速度非?？?。但全球水資源短缺現(xiàn)象致使較為嚴(yán)重的干旱狀況,其問題在中國表現(xiàn)比較嚴(yán)重,也已成為全球關(guān)注的主要問題,因此,培育出抗旱油菜成為當(dāng)下我國油菜生產(chǎn)的一項(xiàng)研究任務(wù)。
　　 隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的飛速發(fā)展,為生物定

2、向改造和分子育種提供了最有效的方法,目前轉(zhuǎn)基因技術(shù)有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、電激法、聚乙二醇(PEG)法、顯微注射法、花粉通道法、基因槍法、離子束介導(dǎo)法等,而農(nóng)桿菌是遺傳轉(zhuǎn)化中比較常用首選的方法,因其操作簡單,成本低廉,也是目前使用最廣泛的一種遺傳轉(zhuǎn)化方法。
　　 本研究中以中油821作為試驗(yàn)材料,主要就影響其轉(zhuǎn)化效率的因素Kan的篩選濃度、菌液的濃度及浸染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮AS是否添加和硝酸銀對(duì)轉(zhuǎn)化的影響等幾個(gè)方面對(duì)其進(jìn)行了分

3、析,創(chuàng)造了高效的農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。采用根癌農(nóng)桿菌方法將控制角質(zhì)膜厚度的SHN1/WIN1基因轉(zhuǎn)化到甘藍(lán)型油菜細(xì)胞中,目的是防止油菜自身體內(nèi)水分過度蒸騰散失,保持體內(nèi)水分的平衡,以此來提高油菜抗旱、抗寒和抗病能力,為提高油菜抗逆性。柴凌燕于2009年構(gòu)建的植物表達(dá)載體PBI121-SHN1/WIN1,為本研究植物表達(dá)載體PBI121-SHN1/WIN1導(dǎo)入農(nóng)桿菌LBA4404奠定了基礎(chǔ),通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將目的基因SHN1/WIN1