凡納濱對(duì)蝦轉(zhuǎn)錄因子c-Jun和STAT在WSSV感染過(guò)程中的功能研究.pdf

1、凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)是我國(guó)對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的主要品種。然而，病害問(wèn)題一直困擾著該產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。其中白斑綜合癥病毒(white spotsyndrome virus，WSSV)是對(duì)蝦的主要病原體，給對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。截止目前，對(duì)WSSV還缺乏有效的治療方法。因此，研究宿主病毒相互作用機(jī)制，對(duì)尋找阻斷病毒感染的靶點(diǎn)具有重要意義。
　　c-Jun是JNK信號(hào)通路下游主要底物分子，參與調(diào)控了許多基

2、因的轉(zhuǎn)錄。本實(shí)驗(yàn)室先前研究表明，凡納濱對(duì)蝦JNK被WSSV利用，輔助病毒復(fù)制和基因的表達(dá)。本文中，我們從凡納濱對(duì)蝦中克隆了c-Jun同源基因（命名為L(zhǎng)vc-Jun），并對(duì)其分子特征以及在WSSV感染過(guò)程中的作用機(jī)制進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，Lvc-Jun定位于細(xì)胞核內(nèi)且可以自身相互作用，其活性受JNK磷酸化調(diào)控。在WSSV感染后，Lvc-Jun轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生顯著上調(diào)，同時(shí)伴隨著其蛋白水平和磷酸化水平的顯著上升。此外，在螯蝦血細(xì)胞中，TPA作為

3、c-Jun誘導(dǎo)劑，可促進(jìn)病毒極早期基因ie1的轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Lvc-Jun可通過(guò)ie1基因啟動(dòng)子上AP-1結(jié)合位點(diǎn)激活ie1的轉(zhuǎn)錄。以上結(jié)果表明，對(duì)蝦Lvc-Jun在病毒感染過(guò)程中被激活，并且其作為JNK下游效應(yīng)分子，參與調(diào)控了WSSV的感染。
　　STAT是細(xì)胞一類非常重要的轉(zhuǎn)錄因子家族，參與調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)分化、凋亡以及免疫反應(yīng)等許多細(xì)胞過(guò)程。許多研究表明，病毒通常會(huì)調(diào)控和利用STAT來(lái)輔助自身的感染。本研究中，我們發(fā)現(xiàn)，

4、WSSV極早期蛋白IE1可以與LvSTAT相互作用，進(jìn)而誘導(dǎo)LvSTAT磷酸化和入核。隨后研究證實(shí)，IE1通過(guò)其C端結(jié)構(gòu)域(81-188aa)與LvSTATN端結(jié)構(gòu)域結(jié)合。此外啟動(dòng)子報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)發(fā)現(xiàn)，LvSTAT可通過(guò)ie1和wsv051啟動(dòng)子區(qū)STAT結(jié)合位點(diǎn)誘導(dǎo)ie1和wsv051的轉(zhuǎn)錄。最后研究發(fā)現(xiàn)，IE1可以促進(jìn)LvSTAT的轉(zhuǎn)錄激活活性，誘導(dǎo)STAT活化來(lái)增強(qiáng)病毒極早期基因ie1和wsv051的轉(zhuǎn)錄。
　　綜上，本文初步