褪黑素對(duì)高糖環(huán)境下大鼠Muller細(xì)胞的抗氧化作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:為探討褪黑素對(duì)高糖環(huán)境下Müller細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用,我們觀察體外培養(yǎng)Müller細(xì)胞中褪黑素膜受體(MT1/MT2)的表達(dá)及在高糖環(huán)境下的變化,并觀察褪黑素及其膜受體拮抗劑(Luzindole)對(duì)高糖環(huán)境下Müller細(xì)胞合成核因子2相關(guān)因子(Nrf-2)和亞鐵血紅素氧化酶(HO-1)的影響,初探褪黑素防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的前景。
　　 方法:(1)酶消化法分離培養(yǎng)大鼠Müller細(xì)胞,細(xì)胞免疫熒光法鑒定細(xì)胞性質(zhì)和純

2、化度。(2)培養(yǎng)細(xì)胞分為正常糖對(duì)照組、高糖組和甘露醇對(duì)照組,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)褪黑素膜受體表達(dá)及變化。(3)培養(yǎng)細(xì)胞分為正常糖對(duì)照組、甘露醇對(duì)照組、、褪黑素+正常糖組、高糖組、褪黑素+高糖組及褪黑素+高糖+Luzindole組。逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)核因子2相關(guān)因子(nuclear factor erythroid2-related factor2,Nrf-2)、亞鐵血紅素氧化酶(hemeoxygenase-1,HO-1)的的表達(dá)及改變。

3、>　　 結(jié)果:(1)酶消化法體外分離培養(yǎng)大鼠Müller細(xì)胞純化度達(dá)95％以上。(2)褪黑素膜受體MT1和MT2在正常糖對(duì)照組、甘露醇對(duì)照組、高糖組均有表達(dá),高糖刺激組表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。(3)褪黑素對(duì)正常糖刺激下Müller細(xì)胞Nrf-2和HO-1合成無(wú)明顯影響;高糖刺激下Nrf-2和HO-1表達(dá)增加,褪黑素誘導(dǎo)下表達(dá)增加顯著,褪黑素膜受體阻滯劑Luzindole干預(yù)下褪黑素的誘導(dǎo)作用被抑制。
　　 結(jié)論:大