參芍口服液對(duì)2型糖尿病腎病大鼠腎臟纖維化及炎癥的影響及機(jī)制.pdf

1、目的：探究參芍口服液(Shenshao oral liquid)對(duì)糖尿病腎病(DN)大鼠炎癥及纖維化的影響及可能機(jī)制。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)采用注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)+高脂飼料(High-fat diet， HFD)喂養(yǎng)的方法復(fù)制糖尿病腎病(DN)模型。將50只SPF級(jí)Wistar大鼠于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房?jī)?nèi)適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，隨機(jī)分為五組，對(duì)照組(Control group)、模型組(DN group)、低劑量

2、組(Low dose group)，中劑量組(Medium dose group)和高劑量組(High dose group)，每組10只，對(duì)照組(CG)用普通無(wú)菌飼料飼養(yǎng)，除對(duì)照組(CG)外各組均予以高脂飼料(HFD)飼養(yǎng)，1月后，除對(duì)照組(CG)外各組均予STZ(25mg/kg)注射于腹腔，連續(xù)測(cè)大鼠尾端血糖2次，每次均≧16.7mom/l為造模成功，待造模成功后，各組均按原來(lái)飼料飼養(yǎng)，低劑量組(LDG)用參芍口服液(SSOL)灌服

3、(125mg/k/d)，中劑量組(MDG)灌服(250mg/kg/d)，高劑量組(HDG)每天灌服(500mg/kg/d)，8周后造模結(jié)束。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前2天搜集各組大鼠24h尿液以測(cè)定24h尿微量白蛋白(Urine micro albumin,UMA)，搜集時(shí)(早晨)將每個(gè)大鼠空腹放在清洗好的代謝籠內(nèi)，第二天將尿液去雜質(zhì)量體積，取樣送檢驗(yàn)科。處死動(dòng)物前取主動(dòng)脈血測(cè)定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)，取腎臟組織標(biāo)本，用HE染色法光鏡下觀察

4、腎臟細(xì)胞病理形態(tài)變化，用Masson染色法觀察腎臟組織纖維化病變，用免疫組化及免疫印跡(Western blot)法檢測(cè)各組大鼠腎組織炎癥因子TLR4、NF-κB及TGF-β1蛋白表達(dá)量的改變。
　　結(jié)果：1一般情況：對(duì)照組(CG)大鼠進(jìn)水、進(jìn)食、神態(tài)無(wú)異常；與對(duì)照組相比模型組(DN)大鼠血糖(blood glucose)升高，進(jìn)水、進(jìn)食多，皮毛晦暗無(wú)光、減少、精神不振、喜臥少動(dòng)、動(dòng)作較慢、排除水分多。與模型組(DN)相比各藥物組

5、(The medicine group)狀況明顯好轉(zhuǎn)。2 Scr、BUN、UMA測(cè)定結(jié)果：第8周末時(shí)，模型組(DN)大鼠24h UMA、Scr、BUN的檢測(cè)值與對(duì)照組(CG)相比顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；各藥物組(TMG)大鼠24h UMA、Scr、BUN的檢測(cè)值與模型組(DN)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。3腎組織病理改變：治療8周后，與對(duì)照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎小球較大、硬化，基底膜變

6、厚、系膜區(qū)基質(zhì)較多，部分腎小囊腔變狹小，各藥物組(TMG)與模型組(DN)相比病理變化較輕，間質(zhì)炎癥細(xì)胞較少。4 Masson染色示與對(duì)照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織纖維化較重，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)大鼠腎組織纖維化較輕。5免疫組化示：與對(duì)照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表達(dá)量上調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)大鼠腎組織

7、TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表達(dá)量下調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。6 Western印跡結(jié)果表明：與對(duì)照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織中TLR4、NF-κB、TGF-β1表達(dá)上調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：1參芍口服液(SSOL)具有抗炎、抗纖維化的作用，且在一定范圍內(nèi)存在劑量依賴(lài)關(guān)系。2參芍口服液