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文檔簡介
1、本實(shí)驗(yàn)以大青楊頂芽為材料提取總RNA,使用Clontech提供的Creator. SMART.cDNA Library Construction Kit成功構(gòu)建了大青楊頂芽cDNA文庫,從文庫中隨機(jī)挑選單克隆測序,用表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)法研究大青楊頂芽的基因表達(dá)。
平板檢測結(jié)果表明構(gòu)建的文庫滴度為7.2×106pfu/mL,重組率達(dá)97%。PCR檢測及序列分析結(jié)果表明插入片段平均長度大于500bp。這表明我們成功構(gòu)建了大
2、青楊項(xiàng)芽cDNA文庫。
從大青楊頂芽cDNA文庫中隨機(jī)挑取3045個(gè)單克隆,測序后,經(jīng)過軟件拼接,得到來自1944個(gè)Unigene的2218條高質(zhì)量ESTs,其中包含180個(gè)序列重疊群(Contig)和1764個(gè)單克隆群(Singletons)。經(jīng)Nr比對后1944個(gè)獨(dú)立基因中,496條獨(dú)立基因有明確的功能注釋,占總獨(dú)立基因的25.41%;822條獨(dú)立基因?yàn)槲粗?,占總?dú)立基因的42.28%:624條獨(dú)立基因?yàn)槲疵鞍?/p>
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