鹽酸頭孢他美的體內分析及其臨床前藥代動力學初步研究.pdf

1、鹽酸頭孢他美注射劑是由合肥醫(yī)工醫(yī)藥有限公司研制開發(fā)，本研究的主要目的是對鹽酸頭孢他美注射劑進行臨床前藥代動力學的整體評價。本文建立了簡單、靈敏、準確可靠、重現性好的HPLC-UV方法，能夠滿足藥物臨床前藥代動力學研究中的技術要求，并使用該方法測定了SD大鼠血漿、SD大鼠各組織以及SD大鼠排泄物等多種生物樣品中頭孢他美的濃度，根據結果對頭孢他美的體內分布、代謝及排泄進行了研究。
　　 研究方法:本文對頭孢他美建立HPLC定量分析方

2、法。檢測不同基質中的頭孢他美所使用的色譜條件及樣品前處理方法均有一定的差異。其中:(1)頭孢他美在SD大鼠血漿、SD大鼠各組織以及人血漿中的分析方法為:分析柱Dionex C18;流動相組成:甲醇-10 mmol/L磷酸二氫鉀（含0.05％甲酸）=25∶75(V/V);采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min;柱溫30℃;紫外檢測波長為262 nm。選擇諾氟沙星作為內標。生物樣品經過簡單傳統(tǒng)的蛋白沉淀方法處理。(2)頭孢他美在緩沖液中

3、的分析方法為:分析柱:分析柱Dionex C18;流動相組成:甲醇-10 mmol/L磷酸二氫鉀（含0.05％甲酸）=35∶65(V/V);采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min;柱溫30℃;紫外檢測波長為262 nm。選擇諾氟沙星作為內標。樣品經過高速離心后直接進樣分析。(3)頭孢他美在SD大鼠尿液、糞便及膽汁中的分析方法為:分析柱:Ultimate C18;流動相組成為:甲醇-磷酸二氫鉀（0.05％甲酸），尿液和糞便中樣品的檢測

4、采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min，膽汁中樣品的檢測采用梯度洗脫;柱溫30℃。采用外標法定量。不同基質中分別使用不同的樣品預處理方法。
　　 按照《化學藥物非臨床研究技術指導原則》的基本要求進行完整的方法學考查，所有生物樣品測定的專屬性、線性、準確度、精密度、回收率、稀釋效應、穩(wěn)定性等均滿足生物樣品的定量分析要求。上述測定方法成功應用于SD大鼠的血漿樣品、組織樣品、血漿蛋白結合樣品以及排泄樣品的研究。研究結果:(1)本試

5、驗設計SD大鼠單劑量靜脈注射給藥鹽酸頭孢他美注射劑25 mg/Kg，50 mg/Kg，75 mg/Kg進行藥代動力學研究。采用HPLC-UV的方法測定不同時間SD大鼠體內的頭孢他美血藥濃度。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美25mg/Kg后，藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(Clτ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為248.99±54.52μg/mL、0.72±0.09h、0

6、.97±0.11h、0.30±0.03 L/h/kg、0.29±0.02 L/kg、84.54±8.85μg·h/mL。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美50 mg/Kg后，藥時曲線的藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(C1τ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為587.88±64.54μg/mL、0.81±0.24 h、0.76±0.24 h、0.37±0.06 L/h/kg、

7、0.28±0.06L/kg、137.08±23.74μg·h/mL。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美75 mg/Kg后，藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(C1τ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為796.54±93.30μg/mL、0.95±0.23 h、0.66±0.08 h、0.36±0.03 L/h/kg、0.24±0.04 L/kg、207.16±18.77μg·h

8、/mL。 C0、AUC0-τ符合線性藥代動力學特征，隨給藥劑量成線性變化。(2) SD大鼠尾靜脈注射鹽酸頭孢他美注射劑50 mg/Kg后，研究頭孢他美在SD大鼠體內的分布情況。結果表明，從總體上來看，各臟器組織中的藥物含量均低于血漿，其中腎中藥物濃度最高，肝、肺、胃、小腸、脂肪、肌肉、子宮和卵巢次之，心、脾、腦、睪丸組織最少。(3)選擇1μg/mL、5μg/mL和16μg/mL三個濃度值進行SD大鼠血漿和人血漿的蛋白結合率測定。實驗結果

9、表明，4℃冰箱透析72 h達平衡后頭孢他美人、SD大鼠血漿蛋白結合率分別約為27％、45％。(4) SD大鼠尾靜脈給藥鹽酸頭孢他美注射劑50 mg/Kg后，研究頭孢他美在SD大鼠體內的排泄特征。尿液、糞便中頭孢他美的48 h累積排泄量分別為5403.59±1052.68μg，820.35±296.06μg，排泄率分別為54.04±10.53％，8.20±2.96％;膽汁中頭孢他美的24 h累積排泄量為3344.23±227.82μg，排