豬瘟病毒E2蛋白抗原區(qū)可溶性表達(dá)及鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、豬瘟(Classical swine fever，CSF)是危害豬健康的重要傳染病之一，具有急性、熱性和高度接觸性等特性，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)在裂解酶的作用下能夠形成4種結(jié)構(gòu)蛋白和8種非結(jié)構(gòu)蛋白。其中，囊膜糖蛋白E2蛋白是免疫優(yōu)勢蛋白，能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生中和性抗體，保護(hù)動物免受豬瘟感染。對E2蛋白的深入研究發(fā)現(xiàn)，A、B、C、D區(qū)域是E2基因中的主要抗原

2、區(qū)，對含有A、B、C、D區(qū)域的E2主要抗原區(qū)的表達(dá)純化對豬瘟疾病的研究和檢測具有重要研究意義和應(yīng)用價值。
　　本研究利用原核表達(dá)系統(tǒng)對E2蛋白中含有A、B、C、D區(qū)域的主要抗原區(qū)基因(531bp)進(jìn)行表達(dá)，將E2抗原區(qū)基因與PET-28a-SUMO表達(dá)載體連接，構(gòu)建表達(dá)載體PET-28a-SUMO-E2。用SUMO作為促溶標(biāo)簽增加蛋白的可溶性，設(shè)置誘導(dǎo)溫度37℃、28℃、16℃和IPTG濃度0.1、0.3、0.5、0.7、1mmo

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