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文檔簡介
1、我國茶樹資源豐富,種植面積世界之最,茶葉籽作為茶葉產(chǎn)業(yè)中的副產(chǎn)品,其油脂含有多種生理活性物質,已被我國衛(wèi)生部批準為新資源食品。但由于對茶葉籽油研究較少,基礎資料及深度開發(fā)極為有限。本研究從茶樹品種和提取工藝入手,探索其對茶葉籽油脂肪酸組成的影響,并根據(jù)其組成特點采用尿素包合法同步分離主要脂肪酸油酸和亞油酸,在此基礎上運用植物乳桿菌產(chǎn)生的亞油酸異構酶對亞油酸進行轉化研究,最終將酶轉化技術與水酶法提油工藝相結合,一步開發(fā)含有共軛亞油酸的茶葉
2、籽油。本論文的主要實驗結果如下:
首先對不同茶樹品種和不同工藝提取的茶葉籽油脂肪酸組成進行了分析,結果顯示:茶葉籽油飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸比值約為1.0:2.7:1.3,其中棕櫚酸相對含量為14.11-16.99%、油酸為46.33-55.48%、亞油酸為23.17-29.40%,3種脂肪酸相對含量在90%以上,品種和工藝對以上指標影響較??;28個品種茶葉籽油中均檢測到17種脂肪酸,主成分分析顯示硬脂酸、異
3、油酸、十七碳酸、棕櫚油酸為特征脂肪酸,其含量可用于品種鑒別;茶葉籽油四種提取工藝對大量脂肪酸無明顯差異,對微量脂肪酸相對含量影響較大。
其次采用尿素包合法對茶葉籽油中油酸和亞油酸的同步分離進行優(yōu)化,分析了尿素脂肪酸比(w/w)、乙醇尿素比(v/w)、包合溫度和包合時間4個因素對油酸和亞油酸純度以及得率的影響,在單因素實驗基礎上通過中心組合試驗優(yōu)化,最終結果表明:在尿素脂肪酸比(w/w)為4.1:1,95%乙醇尿素比(v/w)為
4、3.7:1,結晶溫度為-3℃,結晶時間為7.7h時,分離獲得的油酸純度為72.5%,得率為84.1%,亞油酸純度達到91.0%,得率56.4%。
以亞油酸為底物,通過對植物乳桿菌進行產(chǎn)酶誘導:在發(fā)酵時間為19h,底物亞油酸濃度為3.5mg/mL,初始接種量為3%時可獲得亞油酸異構酶活性最高。此酶最適溫度為35℃,最適pH值為6.5,在此最適條件下,當亞油酸異構酶為2mL,底物茶葉籽油亞油酸濃度為1.5mg/mL時,最終可轉化獲
5、得共軛亞油酸積累量為191.2μg/mL。
最后以水酶法提取技術為基礎,采用果膠酶和亞油酸異構酶復合酶制劑,對茶葉籽油提取過程中對亞油酸進行改性,制備含共軛亞油酸茶葉籽油。通過單因素實驗及中心組合試驗探索果膠酶用量、亞油酸異構酶用量、溫度等條件,開展響應面分析對酶解液共軛亞油酸濃度進行優(yōu)化,結果表明最佳工藝條件為:果膠酶(0.2%)酶量為6.86mL,亞油酸異構酶(4.0U/mL)酶量為5.58mL,反應溫度為43℃。在此條件
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