白鵑梅中黃酮類物質的分離純化和生物活性研究.pdf

1、本研究以白鵑梅為研究對象，優(yōu)化了微波提取白鵑梅黃酮類化合物的工藝條件；對白鵑梅黃酮類物質進行提取、純化及結構鑒定；測定了白鵑梅不同溶劑萃取物以及黃酮類物質的體外抗氧化活性；同時測定了白鵑梅三種黃酮單質對α-葡萄糖苷酶的抑制作用。
　　（1）為了對白鵑梅黃酮類化合物的提取量進行優(yōu)化，利用Box-Behnken進行實驗設計，選取微波功率、提取時間、料液比、提取溫度作為優(yōu)化因素，采用響應面分析法對微波提取白鵑梅黃酮類物質工藝進行優(yōu)化。結

2、果顯示：微波時間和微波溫度對白鵑梅黃酮提取量有顯著性影響。微波輔助提取的最佳工藝條件為：微波功率357W，提取時間63min，料液比1:26g/mL，提取溫度47℃。在此條件下實際提取量為14.59mg/g，與模型預測值14.67mg/g相近。
　?。?）用不同的溶劑對白鵑梅進行分步萃取，利用硅膠柱層析、以及SePhadexLH-20柱層析等多種方法對乙酸乙酯相、正丁醇相進行分離純化，并且通過UV、IR、HPLC、NMR等波譜檢測

3、技術結合物理化學等方法對化合物進行結構鑒定，得到黃酮單質。
　　（3）對白鵑梅分步萃取物進行活性測定，結果表明：乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，水五種溶劑對白鵑梅進行提取得到的提取物中，均有一定的抗氧化活性；經(jīng)過比較，乙酸乙酯相體外抗氧化活性相對最大。對其中的黃酮類物質進行體外抗氧化活性測定，分別測定了對DPPH自由基、羥基（·OH）自由基、超氧基自由基（O2-）三種自由基的清除能力，結果表明白鵑梅總黃酮對三種自由基清除的強弱順序

4、為：DPPH·>·OH>O2-，對DPPH以及羥基自由基有很好的清除效果，對過氧化自由基的清除能力則較低；并且，在一定的范圍內(nèi)，對三種自由基的清除效果與總黃酮濃度呈良好的線性關系。
　?。?）實驗分別對蘆丁、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷三種黃酮單體進行α-葡萄糖苷酶抑制作用進行測定，以阿卡波糖作為陽性對照。實驗表明：三種單體對α-葡萄糖苷酶均有抑制作用，且芹菜素和蘆丁的作用效果優(yōu)于對照物阿卡波糖，芹菜素-7-O-β-D