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文檔簡介
1、本研究利用豬脂肪組織細胞膜蛋白制備卵黃抗體,并通過不同的試驗對其免疫學活性、穩(wěn)定性、生物安全性以及生物學效應進行了評估,旨在探討脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對豬脂肪沉積的影響并通過在體、離體兩方面,從整體、組織、細胞以及分子水平上探討脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體影響脂肪沉積的可能機制。 1 脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對豬脂肪沉積的影響1.1脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體的制備及穩(wěn)定性結果表明:蛋雞四免后,經ELISA檢測,卵黃抗體效價達
2、1∶12 800以上;卵黃抗體與機體非脂肪組織的交叉反應較弱;凍干法對抗體效價影響??;抗體具有良好的熱穩(wěn)定性;室溫下抗體保存300 d效價仍達1∶12 800。提示:用豬脂肪細胞膜蛋白免疫蛋雞可制備高效價的特異抗體,其凍干粉仍保持較高效價、熱穩(wěn)定性好、耐貯存,便于生產上應用。 1.2脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體的生物安全性通過大鼠、豬的慢性毒性試驗初步評估脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體的生物安全性。試驗結果表明:大鼠75 d慢性毒性試
3、驗中未見明顯中毒癥狀和死亡發(fā)生,體重、一般臨床檢查、飼料利用率等指標無異常;生長育肥豬104 d后除了發(fā)現實驗組公豬脾臟指數較高外,一般臨床檢查、飼料利用率、生化、臟器病理組織學等指標均無異常,未發(fā)現該抗體有明顯的毒性作用。提示:脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體粉無明顯的毒副作用。 1.3對生長育肥豬生長性能和脂肪沉積的影響本試驗以脂肪沉積能力較強的杜×(長·梅)三元雜交商品豬為實驗動物,探討脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對不同日齡豬的生
4、長性能和胴體品質的影響。試驗結果表明:在豬的生長前期添加75mg·kg<'-1>脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體粉后,實驗組平均日增重、飼料報酬分別提高13.03%(P<0.01)和7.9%;瘦肉率提高10.3%(P<0.01);實驗組背膘厚、腎周脂肪指數、腸系膜脂肪指數和皮下脂肪指數分別下降24.14%(P<0.01)、27.54%(P<0.05)、20.42%(P<0.01)和28.28%(P<0.01): 飼料中添加脂肪組織細胞
5、膜蛋白卵黃抗體粉可改善肉色,而肌肉pH<,45>值、大理石紋和肌內脂肪含量組問差異均不顯著。在豬生長后期進行同樣處理,發(fā)現實驗組豬6~7肋背膘厚、腎周脂指數、腸系膜脂指數、皮下脂肪指數皆有明顯的下降趨勢,但差異不顯著。結果提示:在育肥豬早期日糧中添加脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體可促進豬生長,提高胴體瘦肉率,降低脂肪比率,改善肉質性狀。 2 脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體影晌豬脂肪沉積的機制研究2.1對豬脂肪代謝相關激素和酶活性的影響豬的日糧中
6、添加75 mg·kg<'-1>脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體粉,104 d后,血清FFA濃度明顯升高(P<0.01),血清葡萄糖和甘油三酯濃度無明顯差異;實驗組血清insulin濃度降低30.81%(P<0.05),leptin濃度下降30.74%(P<0.05);不同部位脂肪細胞的直徑顯著降低;脂肪組織ME活性變化不顯著;脂肪組織LPL活性以及脂肪組織與肌肉組織LPL活性的比值顯著下降(P<0.05)。提示:脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體可以
7、影響脂肪細胞的脂肪合成;血清insulin、leptin以及組織LPL活性的改變可能參與這種作用的調節(jié)。 2.2對豬脂肪組織凋亡相關基因表達的影響試驗結果表明,實驗組豬的皮下、腎周、腸系膜脂肪組織DNA含量分別比對照組下降38.42%(P<0.01)、39.92%(P<0.05)和39.16%,而DNA濃度差異不顯著;實驗組脂肪組織Bcl-xl mRNA相對豐度比對照組下降18.13%(P<0.05);實驗組脂肪組織BaX-α
8、mRNA相對豐度比對照組提高13.79%(P<0.05)。提示:日糧中添加脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體使Bax-α與Bcl-xl基因表達失去平衡,可能誘導豬的脂肪細胞凋亡,上調的Bax-α和下調的Bcl-xl mRNA表達說明脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體是通過線粒體途徑誘導脂肪細胞凋亡。 2.3對脂肪細胞增殖及其凋亡的影響結果表明,用不同濃度(0.1、1.0、10μg/ml)的脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體處理可抑制前脂肪細胞增殖,影響
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