茶中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留HPTLC檢測(cè)及茶多酚對(duì)毒死蜱光解影響研究.pdf

1、大量施用的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留于茶葉及生長(zhǎng)環(huán)境介質(zhì)中，建立滿足茶葉及土壤、水環(huán)境介質(zhì)中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留日常例行工作要求的檢測(cè)方法是農(nóng)藥殘留控制技術(shù)研究的重要內(nèi)容。高效薄層技術(shù)具有多個(gè)樣品同時(shí)檢測(cè)、前處理要求低、快速廉價(jià)等優(yōu)點(diǎn)，是目前液相色譜技術(shù)中可以實(shí)現(xiàn)極性和非極性化合物組成流動(dòng)相、并可以利用不同化合物組合和配比進(jìn)行多次洗脫的一項(xiàng)技術(shù)。研究利用高效薄層技術(shù)探求13種典型農(nóng)藥在茶葉中的分離方法，建立6種有機(jī)磷農(nóng)藥在茶葉、茶園土壤中檢測(cè)方法，以及4

2、種有機(jī)磷農(nóng)藥在水中的檢測(cè)方法。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.對(duì)茶葉中13種典型農(nóng)藥進(jìn)行薄層分離，利用特殊底劑——特丁基甲基醚較好的分離了結(jié)構(gòu)相似、易生成物質(zhì)對(duì)的有機(jī)磷農(nóng)藥;兩種分離方式，即全自動(dòng)多項(xiàng)展開(AMD)和傳統(tǒng)雙槽展缸展開，均可以實(shí)現(xiàn)流動(dòng)相成分及配比與前一次洗脫劑不同;分離8種有機(jī)磷農(nóng)藥，AMD可以實(shí)現(xiàn)23次洗脫一次完成，重復(fù)性比可以3次洗脫的傳統(tǒng)雙槽展缸展開方法優(yōu)越;1次洗脫的傳統(tǒng)雙槽展缸展開方法的靈敏度比AM

3、D多次洗脫的方法高。
　　2.建立茶葉中6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留高效薄層檢測(cè)方法，并應(yīng)用于樣品實(shí)測(cè)，方法簡(jiǎn)單、快速。茶葉樣品經(jīng)過液-液萃取，串聯(lián)固相柱凈化;16個(gè)樣品同時(shí)在1塊預(yù)制高效薄板上點(diǎn)樣，AMD實(shí)現(xiàn)1次分離過程中7次洗脫;洗脫溶劑化合物極性差為5.1。靈敏度在10～30 ng之間;0.2～2.0 mg·kg-1樣品添加水平，除毒死蜱外回收率均滿足日常例行的檢測(cè)需求。
　　3.建立茶園土壤中6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，應(yīng)用于

4、部分茶園土壤的實(shí)測(cè)。樣品經(jīng)液-液萃取，直接檢測(cè);16個(gè)樣品同時(shí)在1塊預(yù)制高效薄板上檢測(cè)，AMD或傳統(tǒng)雙槽展缸1次分離過程中2次洗脫;靈敏度在10～30 ng之間，0.1～1.0 mg·kg-1樣品添加水平，毒死蜱回收率較低，其余均滿足日常例行的檢測(cè)需求。
　　4.建立水中4種有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)方法，樣品經(jīng)液-液萃取，直接檢測(cè);4種農(nóng)藥5、1、0.5×10-8 g·ml-1添加水平，回收率在86.05％～109.80％之間，變異系數(shù)在1

5、.28～5.28％，滿足農(nóng)藥殘留分析要求。
　　光解是食品和環(huán)境介質(zhì)中有機(jī)磷農(nóng)藥重要降解途徑，受到溶解性有機(jī)質(zhì)(DOM)酚類衍生物的影響。茶多酚是典型DOM，但茶多酚類物質(zhì)對(duì)污染物光解的影響并不明確。研究選取茶多酚主要活性成分EGCG及氧化物TF、有機(jī)磷農(nóng)藥模型物毒死蜱，以“高壓汞燈-茶多酚-毒死蜱-水”為研究系統(tǒng)，建立水中毒死蜱HPLC、GC和UPLC檢測(cè)方法，控制不同系統(tǒng)條件，調(diào)查茶多酚對(duì)水中毒死蜱光解影響;對(duì)EGCG和毒死蜱

6、共存體系進(jìn)行紫外和熒光光譜檢測(cè)，并利用捕捉劑對(duì)系統(tǒng)中活性中間體HO·和激發(fā)三線態(tài)中間體進(jìn)行捕捉，探討茶多酚對(duì)水中毒死蜱光解影響的作用機(jī)理。結(jié)果如下:
　　1.建立不同水溶液系統(tǒng)中毒死蜱的GC、HPLC和UPLC-MS-MS檢測(cè)方法，比較方法特點(diǎn)，指出應(yīng)用范圍，利用建立的方法對(duì)水中毒死蜱在茶多酚類物質(zhì)EGCG和TF的作用下光解進(jìn)行測(cè)定。
　　2.蒸餾水中EGCG和TF對(duì)毒死蜱光解過程的影響，在光照起始階段使毒死蜱濃度快速下降，

7、然后上升，之后多數(shù)情況呈現(xiàn)較為平穩(wěn)的下降趨勢(shì);比較毒死蜱單獨(dú)存在的水溶液，EGCG和TF對(duì)毒死蜱光解先敏化再抑制的作用，與濃度有關(guān);由于光解中毒死蜱濃度的變化趨勢(shì)不確定，毒死蜱光解半衰期不能用簡(jiǎn)單的模型確定。pH穩(wěn)定的緩沖液中，茶多酚對(duì)毒死蜱光解的影響與pH沒有遞增的正相關(guān)性;EGCG比TF對(duì)毒死蜱的光解影響更為復(fù)雜與強(qiáng)烈;緩沖液較非緩沖溶液毒死蜱光解受EGCG和TFD影響強(qiáng)度小，符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)模型。
　　3.紫外和熒光檢測(cè)顯

8、示，水溶液中與毒死蜱共存的EGCG增加了系統(tǒng)對(duì)光的吸收，并展現(xiàn)更強(qiáng)的光活性，使難以接受光子即光量子產(chǎn)率極低的毒死蜱通過EGCG的能量傳遞而受到激發(fā)，對(duì)毒死蜱光解起到敏化作用;HO·捕捉實(shí)驗(yàn)證明，水溶液中與毒死蜱共存的EGCG可以促進(jìn)系統(tǒng)HO·的產(chǎn)生，形成氧化環(huán)境，有助于毒死蜱氧化;光解中檢測(cè)到毒死蜱的氧化產(chǎn)物——氧化毒死蜱，證明光氧化途徑仍然是與EGCG共存的水溶液中毒死蜱光解的途徑之一。
　　4.利用山梨酸成功捕捉光照過程中毒死

9、蜱激發(fā)三線態(tài)，證明毒死蜱光解途徑之一是通過激發(fā)三線態(tài)轉(zhuǎn)化，同時(shí)證明EGCG可以抑制這一過程;EGCG對(duì)典型激發(fā)三線態(tài)模型物光解的影響結(jié)果，佐證了EGCG對(duì)毒死蜱激發(fā)三線態(tài)的抑制作用。熒光檢測(cè)顯示光照時(shí)毒死蜱可能與EGCG產(chǎn)生光不穩(wěn)定絡(luò)合物，再次光照后可能釋放毒死蜱; EGCG的抗氧化還原作用可能使毒死蜱母體濃度升高?？偨Y(jié)毒死蜱光照過程中濃度上升的主要原因是EGCG對(duì)毒死蜱激發(fā)三線態(tài)的還原和抑制，絡(luò)合物的生成以及EGCG的抗氧化還原作用。