茶中有機磷農藥殘留HPTLC檢測及茶多酚對毒死蜱光解影響研究.pdf

1、大量施用的有機磷農藥殘留于茶葉及生長環(huán)境介質中，建立滿足茶葉及土壤、水環(huán)境介質中有機磷農藥殘留日常例行工作要求的檢測方法是農藥殘留控制技術研究的重要內容。高效薄層技術具有多個樣品同時檢測、前處理要求低、快速廉價等優(yōu)點，是目前液相色譜技術中可以實現(xiàn)極性和非極性化合物組成流動相、并可以利用不同化合物組合和配比進行多次洗脫的一項技術。研究利用高效薄層技術探求13種典型農藥在茶葉中的分離方法，建立6種有機磷農藥在茶葉、茶園土壤中檢測方法，以及4

2、種有機磷農藥在水中的檢測方法。
　　主要研究結果如下:
　　1.對茶葉中13種典型農藥進行薄層分離，利用特殊底劑——特丁基甲基醚較好的分離了結構相似、易生成物質對的有機磷農藥;兩種分離方式，即全自動多項展開(AMD)和傳統(tǒng)雙槽展缸展開，均可以實現(xiàn)流動相成分及配比與前一次洗脫劑不同;分離8種有機磷農藥，AMD可以實現(xiàn)23次洗脫一次完成，重復性比可以3次洗脫的傳統(tǒng)雙槽展缸展開方法優(yōu)越;1次洗脫的傳統(tǒng)雙槽展缸展開方法的靈敏度比AM

3、D多次洗脫的方法高。
　　2.建立茶葉中6種有機磷農藥殘留高效薄層檢測方法，并應用于樣品實測，方法簡單、快速。茶葉樣品經過液-液萃取，串聯(lián)固相柱凈化;16個樣品同時在1塊預制高效薄板上點樣，AMD實現(xiàn)1次分離過程中7次洗脫;洗脫溶劑化合物極性差為5.1。靈敏度在10～30 ng之間;0.2～2.0 mg·kg-1樣品添加水平，除毒死蜱外回收率均滿足日常例行的檢測需求。
　　3.建立茶園土壤中6種有機磷農藥殘留檢測方法，應用于

4、部分茶園土壤的實測。樣品經液-液萃取，直接檢測;16個樣品同時在1塊預制高效薄板上檢測，AMD或傳統(tǒng)雙槽展缸1次分離過程中2次洗脫;靈敏度在10～30 ng之間，0.1～1.0 mg·kg-1樣品添加水平，毒死蜱回收率較低，其余均滿足日常例行的檢測需求。
　　4.建立水中4種有機磷農藥檢測方法，樣品經液-液萃取，直接檢測;4種農藥5、1、0.5×10-8 g·ml-1添加水平，回收率在86.05％～109.80％之間，變異系數(shù)在1

5、.28～5.28％，滿足農藥殘留分析要求。
　　光解是食品和環(huán)境介質中有機磷農藥重要降解途徑，受到溶解性有機質(DOM)酚類衍生物的影響。茶多酚是典型DOM，但茶多酚類物質對污染物光解的影響并不明確。研究選取茶多酚主要活性成分EGCG及氧化物TF、有機磷農藥模型物毒死蜱，以“高壓汞燈-茶多酚-毒死蜱-水”為研究系統(tǒng)，建立水中毒死蜱HPLC、GC和UPLC檢測方法，控制不同系統(tǒng)條件，調查茶多酚對水中毒死蜱光解影響;對EGCG和毒死蜱

6、共存體系進行紫外和熒光光譜檢測，并利用捕捉劑對系統(tǒng)中活性中間體HO·和激發(fā)三線態(tài)中間體進行捕捉，探討茶多酚對水中毒死蜱光解影響的作用機理。結果如下:
　　1.建立不同水溶液系統(tǒng)中毒死蜱的GC、HPLC和UPLC-MS-MS檢測方法，比較方法特點，指出應用范圍，利用建立的方法對水中毒死蜱在茶多酚類物質EGCG和TF的作用下光解進行測定。
　　2.蒸餾水中EGCG和TF對毒死蜱光解過程的影響，在光照起始階段使毒死蜱濃度快速下降，

7、然后上升，之后多數(shù)情況呈現(xiàn)較為平穩(wěn)的下降趨勢;比較毒死蜱單獨存在的水溶液，EGCG和TF對毒死蜱光解先敏化再抑制的作用，與濃度有關;由于光解中毒死蜱濃度的變化趨勢不確定，毒死蜱光解半衰期不能用簡單的模型確定。pH穩(wěn)定的緩沖液中，茶多酚對毒死蜱光解的影響與pH沒有遞增的正相關性;EGCG比TF對毒死蜱的光解影響更為復雜與強烈;緩沖液較非緩沖溶液毒死蜱光解受EGCG和TFD影響強度小，符合一級動力學反應模型。
　　3.紫外和熒光檢測顯

8、示，水溶液中與毒死蜱共存的EGCG增加了系統(tǒng)對光的吸收，并展現(xiàn)更強的光活性，使難以接受光子即光量子產率極低的毒死蜱通過EGCG的能量傳遞而受到激發(fā)，對毒死蜱光解起到敏化作用;HO·捕捉實驗證明，水溶液中與毒死蜱共存的EGCG可以促進系統(tǒng)HO·的產生，形成氧化環(huán)境，有助于毒死蜱氧化;光解中檢測到毒死蜱的氧化產物——氧化毒死蜱，證明光氧化途徑仍然是與EGCG共存的水溶液中毒死蜱光解的途徑之一。
　　4.利用山梨酸成功捕捉光照過程中毒死

9、蜱激發(fā)三線態(tài)，證明毒死蜱光解途徑之一是通過激發(fā)三線態(tài)轉化，同時證明EGCG可以抑制這一過程;EGCG對典型激發(fā)三線態(tài)模型物光解的影響結果，佐證了EGCG對毒死蜱激發(fā)三線態(tài)的抑制作用。熒光檢測顯示光照時毒死蜱可能與EGCG產生光不穩(wěn)定絡合物，再次光照后可能釋放毒死蜱; EGCG的抗氧化還原作用可能使毒死蜱母體濃度升高?？偨Y毒死蜱光照過程中濃度上升的主要原因是EGCG對毒死蜱激發(fā)三線態(tài)的還原和抑制，絡合物的生成以及EGCG的抗氧化還原作用。