桔霉素分子印跡仿生酶聯(lián)免疫檢測方法研究.pdf

1、本研究采用本體聚合方法以3，5-二羥基-2-萘甲酸為假模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，在酶標板孔表面直接紫外引發(fā)合成了對桔霉素分子印跡聚合物膜，成功將分子印跡技術(shù)應(yīng)用于免疫分析中，建立了一種食品中桔霉素分子印跡仿生酶聯(lián)免疫吸附法。研究對分子印跡膜合成參數(shù)和條件進行了詳細優(yōu)化，并通過掃描電鏡對分子印跡膜進行了結(jié)構(gòu)表征。并且，通過平衡結(jié)合實驗和吸附動力學(xué)實驗考察了分子印跡膜的吸附性能。實驗結(jié)果表明:所合成的分子

2、印跡聚合物膜對桔霉素具有良好的特異性吸附能力和較快的吸附速度。印跡膜飽和吸附容量達到1.07μg well-1，明顯高于非印跡聚合物膜（0.213μg well-1）。當桔霉素濃度為50mgL-1時，10min內(nèi)可達到最大吸附容量的54.9％;30min時可達到最大吸附容量的97.3％;吸附40min達到吸附平衡。研究以此分子印跡膜為仿生抗體，針對桔霉素建立了直接競爭仿生酶聯(lián)免疫分析法。在優(yōu)化的實驗條件下，方法靈敏度（IC50）和最低檢

3、出限(IC15)分別達到109.20μg L-1和0.50μg L-1。對谷物中的五種生物毒素的交叉反應(yīng)率均不超過4.7％。此方法被成功地應(yīng)用于米飯，玉米，米醋三種樣品中的桔霉素的分析檢測，三個添加濃度下的回收率分別達到73.2％-89.9％，64.3-86.2％和82.3-92.8％。與高效液相色譜方法檢測結(jié)果相比，檢測結(jié)果具有很好的一致性，相關(guān)系數(shù)為0.9942。本研究內(nèi)容為食品樣品中桔霉素檢測提供了一種穩(wěn)定、可行、低成本的檢測方法