米糠蛋白的提取及其抗氧化肽的研究.pdf

1、I摘要本文以新鮮米糠、膨化米糠、脫油米糠為原料，采用3種化學(xué)提取法，以蛋白質(zhì)提取率為指標(biāo)，通過(guò)正交試驗(yàn)確定了米糠蛋白提取的料液比、pH、溫度、時(shí)間、鹽溶液的濃度；同時(shí)，研究了米糠抗氧化活性肽的制備、分離純化以及抗氧化效果。其結(jié)果如下：1.堿法提取的結(jié)果表明，新鮮米糠蛋白的最佳工藝條件：時(shí)間2.5h，pH值11，溫度30℃，料液比1:11，提取率為34.49%；膨化米糠最佳工藝條件：時(shí)間2.5h，pH值12，溫度50℃，料液比1:9，提取

2、率為25.44%；脫油米糠最佳工藝條件：時(shí)間3h，pH值13，溫度35℃，料液比1:10，提取率為24.3%。酸法提取的結(jié)果表明，新鮮米糠最佳工藝條件：時(shí)間3h，pH值0.5，溫度35℃，料液比1:11，提取率為25.88%；膨化米糠最佳工藝條件：時(shí)間3.5h，pH值0.5，溫度35℃，料液比1:10，提取率為33.64%；脫油米糠最佳工藝條件：時(shí)間3.5h，pH值0.5，溫度40℃，料液比1:8，提取率為18.18%。鹽法提取的結(jié)果表

3、明，新鮮米糠蛋白最佳工藝條件：NaCl為0.6molL，溫度35℃，料液比1:11，時(shí)間3.5h，提取率為15.66%。膨化米糠最佳工藝條件：NaCl為0.4molL，溫度40℃，料液比1:11，時(shí)間3.5h，提取率為15.55%；脫油米糠最佳工藝條件：NaCl為0.6molL，溫度45℃，料液比1:10，時(shí)間2.5h，提取率為7.86%。3步法的總蛋白質(zhì)提取率分別為：新鮮米糠達(dá)60.12%，膨化米糠達(dá)56.57%，脫油米糠為48.23

4、%。2.以所提取的新鮮、膨化、脫油3種米糠蛋白為對(duì)象，研究了胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶水解這三種米糠蛋白的進(jìn)程特性，并考察經(jīng)5種蛋白酶水解后3種米糠蛋白酶解物對(duì)ABTS自由基的清除效果，從中篩選最合適制備米糠抗氧化肽的酶和米糠蛋白。同時(shí)，采用響應(yīng)面法優(yōu)化了堿性蛋白酶水解脫油米糠蛋白制備抗氧化肽的工藝參數(shù)，結(jié)果表明：選用堿性蛋白酶和脫油米糠蛋白制備抗氧化肽的效果最好；最佳酶解條件為：酶與底物濃度[E][S]比為

5、1.8%、溫度50℃、時(shí)間4.6h、pH9.0、底物濃度[S]為5.0%，所得肽對(duì)ABTS自由基具有較強(qiáng)的清除作用，清除率達(dá)71.85%。3.以脫油米糠蛋白酶解物為對(duì)象，選用6種體外抗氧化模型對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行了測(cè)定，研究了不同水解度以及RBPHs濃度對(duì)氧化效果的影響，結(jié)果表明：不同水解度的RBPHs具有不同的抗氧化活性，不同的模型均有各自的最適的DH；RPBHs的活性與濃度均成正相關(guān)，對(duì)DPPH清除效果最為明顯，其EC50僅為0.52