酪蛋白糖巨肽適于規(guī)模生產(chǎn)及抑制流感作用的研究.pdf

1、酪蛋白糖巨肽(Casein Glycomacropeptide, CGMP)產(chǎn)生于干酪制作的過(guò)程中,它具有非常豐富的生物學(xué)活性。本課題以離子交換樹脂為分離介質(zhì),對(duì)適于規(guī)模生產(chǎn)CGMP的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,并將在此條件下制備出的CGMP產(chǎn)品進(jìn)行抑制流感病毒的相關(guān)實(shí)驗(yàn),從而對(duì)CGMP能抑制流感病毒這一生物活性加以驗(yàn)證。
　　本試驗(yàn)在現(xiàn)有酪蛋白糖巨肽分離制備工藝方法的基礎(chǔ)上,對(duì)離子交換法分離制備酪蛋白糖巨肽規(guī)?；苽溥^(guò)程中的五個(gè)工藝指標(biāo)(

2、即上樣體積、上樣流速、洗脫液濃度、洗脫液體積、樹脂使用周期)進(jìn)行優(yōu)化,由此建立起的工藝路線為:在對(duì)乳清粉溶液用等電點(diǎn)法進(jìn)行除雜等預(yù)處理后,將處理好的乳清粉溶液配制成濃度為0.02g/mL、pH為3.9、體積為樹脂體積3倍的樣品,以0.8L/min的上樣流速泵入交換柱中進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,在用緩沖液清洗樹脂后用濃度為0.6mol/L的氯化鈉溶液對(duì)酪蛋白糖巨肽進(jìn)行洗脫,然后使用超濾膜(6000u)對(duì)收集到的洗脫液進(jìn)行脫鹽濃縮,凍干后即可得到CGM

3、P產(chǎn)品。進(jìn)行此工藝方法生產(chǎn)酪蛋白糖巨肽的樹脂使用周期為4次。使用該工藝制備酪蛋白糖巨肽的過(guò)程中總共使用的乳清粉溶液體積為108L、樹脂36L,制備酪蛋白糖巨肽產(chǎn)品共16.87g,得率為0.781g/100g乳清粉。計(jì)算后可得知酪蛋白糖巨肽的純度為80.35％、回收率為46.77%、唾液酸含量為15.5g/100g蛋白。
　　在此工藝條件下生產(chǎn)出的CGMP產(chǎn)品可用于對(duì)流感病毒的抑制實(shí)驗(yàn),通過(guò)對(duì)流感病毒的血凝抑制實(shí)驗(yàn)表明酪蛋白糖巨肽在

4、抑制流感病毒造成的血凝現(xiàn)象有一定作用,且最低濃度可到1mg/ml。
　　本課題優(yōu)化了規(guī)?；蛛x制備CGMP過(guò)程中的相關(guān)工藝指標(biāo),建立起一條較成熟可操作性高且易推廣的工藝路線,且由此工藝路線能得到高純度、高唾液酸含量的CGMP產(chǎn)品,為 CGMP工業(yè)化生產(chǎn)以及多領(lǐng)域開發(fā)和應(yīng)用提供一定參考和支持;試驗(yàn)結(jié)果還表明CGMP中的唾液酸對(duì)甲型H1N1和乙型流感病毒有抑制作用,這為流行性感冒的預(yù)防和治療提供了一定的理論依據(jù),也為新型流感治療藥物的