酪蛋白糖巨肽適于規(guī)模生產(chǎn)及抑制流感作用的研究.pdf

1、酪蛋白糖巨肽(Casein Glycomacropeptide, CGMP)產(chǎn)生于干酪制作的過程中,它具有非常豐富的生物學活性。本課題以離子交換樹脂為分離介質(zhì),對適于規(guī)模生產(chǎn)CGMP的工藝條件進行優(yōu)化,并將在此條件下制備出的CGMP產(chǎn)品進行抑制流感病毒的相關(guān)實驗,從而對CGMP能抑制流感病毒這一生物活性加以驗證。
　　本試驗在現(xiàn)有酪蛋白糖巨肽分離制備工藝方法的基礎上,對離子交換法分離制備酪蛋白糖巨肽規(guī)?；苽溥^程中的五個工藝指標(

2、即上樣體積、上樣流速、洗脫液濃度、洗脫液體積、樹脂使用周期)進行優(yōu)化,由此建立起的工藝路線為:在對乳清粉溶液用等電點法進行除雜等預處理后,將處理好的乳清粉溶液配制成濃度為0.02g/mL、pH為3.9、體積為樹脂體積3倍的樣品,以0.8L/min的上樣流速泵入交換柱中進行動態(tài)吸附,在用緩沖液清洗樹脂后用濃度為0.6mol/L的氯化鈉溶液對酪蛋白糖巨肽進行洗脫,然后使用超濾膜(6000u)對收集到的洗脫液進行脫鹽濃縮,凍干后即可得到CGM

3、P產(chǎn)品。進行此工藝方法生產(chǎn)酪蛋白糖巨肽的樹脂使用周期為4次。使用該工藝制備酪蛋白糖巨肽的過程中總共使用的乳清粉溶液體積為108L、樹脂36L,制備酪蛋白糖巨肽產(chǎn)品共16.87g,得率為0.781g/100g乳清粉。計算后可得知酪蛋白糖巨肽的純度為80.35％、回收率為46.77%、唾液酸含量為15.5g/100g蛋白。
　　在此工藝條件下生產(chǎn)出的CGMP產(chǎn)品可用于對流感病毒的抑制實驗,通過對流感病毒的血凝抑制實驗表明酪蛋白糖巨肽在

4、抑制流感病毒造成的血凝現(xiàn)象有一定作用,且最低濃度可到1mg/ml。
　　本課題優(yōu)化了規(guī)?；蛛x制備CGMP過程中的相關(guān)工藝指標,建立起一條較成熟可操作性高且易推廣的工藝路線,且由此工藝路線能得到高純度、高唾液酸含量的CGMP產(chǎn)品,為 CGMP工業(yè)化生產(chǎn)以及多領域開發(fā)和應用提供一定參考和支持;試驗結(jié)果還表明CGMP中的唾液酸對甲型H1N1和乙型流感病毒有抑制作用,這為流行性感冒的預防和治療提供了一定的理論依據(jù),也為新型流感治療藥物的