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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:(1)觀察轉(zhuǎn)錄因子FoxO1對(duì) INS-1細(xì)胞生存的影響(2)研究白藜蘆醇對(duì)INS-1細(xì)胞增殖和凋亡的作用(3)探討白藜蘆醇對(duì)INS-1細(xì)胞生存影響的機(jī)制。
方法:(1)蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)不同葡萄糖濃度下和加入白藜蘆醇培養(yǎng)INS-1細(xì)胞FoxO1蛋白的表達(dá)。(2)CCK-8法檢測(cè)胰島素和白藜蘆醇共同培養(yǎng)下INS-1細(xì)胞增殖情況。(3)CCK-8法檢測(cè)不同葡萄糖濃度和不同白藜蘆醇濃度下培養(yǎng)的
2、INS-1細(xì)胞增殖情況。(4)流式細(xì)胞術(shù)和Tunel法檢測(cè)不同濃度白藜蘆醇培養(yǎng)的INS-1細(xì)胞凋亡情況。(5)蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)不同濃度白藜蘆醇處理的INS-1細(xì)胞Bcl-2、Bax、CHOP和IRE1a的表達(dá)。
結(jié)果:(1)FoxO1的表達(dá)隨葡萄糖濃度增加而增強(qiáng),而且白藜蘆醇對(duì)高糖條件下 FoxO1蛋白表達(dá)的影響無顯著性差異(P>0.05)。(2)與非胰島素組相比,胰島素組INS-1細(xì)胞增殖率
3、無顯著變化(P>0.05)。(3)在不同葡萄糖濃度中加入40mM的白藜蘆醇,培養(yǎng)INS-1細(xì)胞48小時(shí),細(xì)胞增殖率均受到抑制(P﹤0.05)。(4)在15mM葡萄糖濃度下,白藜蘆醇抑制INS-1細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡,呈量效和時(shí)效關(guān)系。(5)INS-1細(xì)胞中Bcl-2蛋白表達(dá)隨白藜蘆醇濃度增加而下降,Bax則增加。(6)INS-1細(xì)胞中Chop和IRE1a蛋白表達(dá)隨白藜蘆醇濃度增加而增加。
結(jié)論:(1)葡萄糖是維持胰島b細(xì)胞
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