殼聚糖納米粒子抑菌效果及免疫效果評(píng)價(jià).pdf

1、殼聚糖(chitosan)是一種天然陽(yáng)離子聚合物,來(lái)源豐富,成本低,具有良好的生物相容性、生物可降解性、無(wú)毒性,同時(shí)還具有抗菌、殺菌、抗腫瘤、提高免疫能力、促進(jìn)組織修復(fù)及止血的作用,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有極廣闊的前景。將殼聚糖制備成緩釋制劑可減少給藥次數(shù),而且可以提高藥物安全性、有效性及可靠性。理想的佐劑需要具備以下特點(diǎn)：無(wú)毒性、無(wú)免疫原性、較好的生物相容性、可生物降解、能有效誘導(dǎo)或增強(qiáng)細(xì)胞免疫及長(zhǎng)效性,因此,殼聚糖具有開(kāi)發(fā)成為新型免疫佐劑

2、的潛在價(jià)值。
　　 本研究以殼聚糖為材料,采用離子交聯(lián)法,以三聚磷酸鈉(TPP)為交聯(lián)劑,制備殼聚糖納米粒子,并且對(duì)其抑菌性能進(jìn)行研究。粒徑分析和原子力學(xué)顯微鏡(AFM)分析結(jié)果表明,殼聚糖納米粒子呈顆粒狀,粒度均一,分散性良好,四種不同濃度的TPP制備的殼聚糖納米粒子粒徑分別為14.128±0.026nm、29.132±0.032nm、44.333±0.104nm和70.284±0.063nm。抑菌性能研究結(jié)果表明,殼聚糖納米

3、粒子對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)均有抑制作用,抑菌效果優(yōu)于殼聚糖本身,且殼聚糖納米粒子對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果略優(yōu)于大腸桿菌。
　　 以牛血清白蛋白(BSA)為蛋白類藥物模型,進(jìn)行殼聚糖納米粒子對(duì)BSA的吸附性能研究,討論了吸附條件對(duì)吸附率的影響,隨后評(píng)價(jià)了載BSA殼聚糖納米粒子的體外釋放行為,結(jié)果表明,優(yōu)化吸附蛋白類藥物的條件后的吸附率為21.82±1.43％,載BSA殼聚糖納米粒子72小時(shí)累積釋放量為32.98±2.3

4、5％,緩釋效果明顯。
　　 在體內(nèi)免疫研究中,殼聚糖納米粒吸附牛冠狀病毒核衣殼蛋白(Bovinecoronavirus N protein,BCV-N)作為模板藥物,吸附率達(dá)到73.26±1.32％,然后用載BCV-N蛋白殼聚糖納米粒通過(guò)肌肉注射免疫BALB／c小鼠,用間接ELISA方法檢測(cè)血清中IgG、IgM和IgA抗體水平及動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果表明,殼聚糖納米粒子的緩釋效果明顯,且本身沒(méi)有免疫原性,可顯著提高免疫后小鼠體內(nèi)的IgG