酸乳中益生菌分鑒方法的研究.pdf

1、益生菌的功能性和保健功效已被世界公認(rèn)，而且還在不斷研究發(fā)現(xiàn)其新的保健功效。目前，益生菌在食品、藥品等行業(yè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，在食品行業(yè)中主要應(yīng)用于乳制品。益生菌產(chǎn)品中益生菌的種類和數(shù)量是衡量該類產(chǎn)品質(zhì)量?jī)?yōu)劣的重要指標(biāo)之一。然而目前對(duì)益生菌產(chǎn)品中不同種類的益生菌尚無(wú)簡(jiǎn)單、快速、有效的分鑒方法，因而難于對(duì)該類產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。故尋找簡(jiǎn)單、快速、有效的益生菌分鑒方法勢(shì)在必行。
　　 本課題以酸乳為研究對(duì)象，采用生理生化法、菌體全細(xì)胞蛋

2、白電泳法、菌體全細(xì)胞電泳法、菌體全細(xì)胞紅外光譜分析等多種方法對(duì)酸乳中不同種類的益生菌進(jìn)行了檢測(cè)與鑒定，為快速、準(zhǔn)確地分鑒益生菌提供科學(xué)依據(jù)和實(shí)驗(yàn)方法，以推動(dòng)我國(guó)益生菌乳品的良性發(fā)展。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，主要得出以下結(jié)論：
　　 通過(guò)生理生化法對(duì)益生菌進(jìn)行檢測(cè)鑒定，主要考查了五種實(shí)驗(yàn)方法：①活菌指示劑TTC-MRS瓊脂法，結(jié)果表明：pH5.4和pH7.0的TTC-MRS瓊脂培養(yǎng)基可用于保加利亞乳桿菌與嗜熱鏈球菌的鑒定。在pH5.4的TTC-

3、MRS瓊脂培養(yǎng)基中，首先出現(xiàn)菌落的都是保加利亞乳桿菌；在pH7.0的TTC-MRS瓊脂培養(yǎng)基中，首先出現(xiàn)菌落的都是嗜熱鏈球菌，實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性良好。②CaCO3 GYP培養(yǎng)基透明圈法，結(jié)果表明：嗜熱鏈球菌形成的透明圈呈明顯圓形，很規(guī)整，菌落也呈光滑的圓球狀；而保加利亞乳桿菌所形成的透明圈形狀各異，不規(guī)整，菌落形態(tài)也不規(guī)則。因此，可以根據(jù)保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌在CaCO3 GYP瓊脂培養(yǎng)基中生長(zhǎng)所形成透明圈形態(tài)的差異和菌落自身的形態(tài)差異來(lái)鑒

4、定它們。③MRS瓊脂柱狀厭氧管法，結(jié)果表明：嗜熱鏈球菌菌落形態(tài)呈圓餅狀，菌落周?chē)容^規(guī)則，保加利亞
　　 對(duì)益生菌的全細(xì)胞蛋白進(jìn)行電泳，結(jié)果表明：保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌在7.5％的分離膠濃度條件下的全細(xì)胞蛋白圖譜有明顯差異，通過(guò)其條帶積分光密度分析可見(jiàn)，保加利亞乳桿菌有10條蛋白條帶，嗜熱鏈球菌只有6條蛋白條帶，保加利亞乳桿菌的蛋白條帶遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于嗜熱鏈球菌的蛋白條帶，并且2＃蛋白條帶是區(qū)分兩者的關(guān)鍵，其蛋白含量和電泳遷移率都截

5、然不同。
　　 通過(guò)對(duì)鮮乳、酸乳中蛋白質(zhì)的電泳、薄層色譜對(duì)比分析，無(wú)論是電泳還是薄層色譜均未能達(dá)到對(duì)保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌分離鑒定的目的；但是，令人欣慰的是，無(wú)論是從電泳中蛋白條帶、蛋白含量上，還是從薄層色譜中斑點(diǎn)的數(shù)量上，都可以清楚的看出發(fā)酵酸乳與鮮乳中蛋白質(zhì)的差異，從而可以鑒定酸乳是否通過(guò)益生菌發(fā)酵生產(chǎn)的。
　　 通過(guò)對(duì)益生菌菌體全細(xì)胞的電泳分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌體細(xì)胞在凝膠中泳動(dòng)比較雜亂，沒(méi)有規(guī)律，并且無(wú)法進(jìn)行在線監(jiān)