LeT-7a靶向HMGA2調(diào)控鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移功能及機(jī)制研究.pdf

1、[目的]：
　　1.探討let-7a和HMGA2在鼻咽癌及正常鼻咽粘膜組織樣品的表達(dá)情況，以及它們表達(dá)與鼻咽癌患者臨床特征的聯(lián)系。
　　2、研究let-7a和HMGA2對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的遷移及侵襲功能影響。
　　3、探討let-7a和HMGA2影響鼻咽癌細(xì)胞遷移及侵襲可能的分子機(jī)制。
　　[方法]：
　　通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)48例鼻咽癌及鼻咽上皮組織let-7a和HMGA2的表達(dá)。在miRNA靶基因數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)

2、let-7a調(diào)控HMGA2的3'-UTR位點(diǎn)，雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)let-7a對(duì)靶基因HMGA2的直接調(diào)控作用，通過(guò)qRT-PCR和Western Blot檢測(cè)let-7a與HMGA2的mRNA和蛋白水平的影響。Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)let-7a和HMGA2對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。通過(guò)Western Blot檢測(cè)let-7a和HMGA2在鼻咽癌細(xì)胞中對(duì)侵襲相關(guān)蛋白的影響。
　　[結(jié)果]：
　　1.L

3、et-7a在鼻咽癌組織中低表達(dá)(P＜0.001)，并且其低表達(dá)與鼻咽癌患者的臨床分期(P=0.014)，T分期(P=0.009)，N分期相關(guān)(P=0.039)。
　　2.HMGA2在鼻咽癌組織中高表達(dá)(P＜0.001)，并且其高表達(dá)與鼻咽癌患者的臨床分期(P=0.024)，N分期相關(guān)(P=0.002)。
　　3.在48鼻咽癌患者組織樣本中，let-7a與HMGA2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.385，P=0.007)。
　

4、　4.通過(guò)miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)HMGA2的3'UTR區(qū)域存在let-7a的結(jié)合位點(diǎn)，并且通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證實(shí)let-7a直接與HMGA2的3'UTR區(qū)域結(jié)合，通過(guò)qRT-PCR和Western Blot發(fā)現(xiàn)，let-7a負(fù)性調(diào)控HMGA2的蛋白質(zhì)表達(dá)，對(duì)其mRNA無(wú)影響。此外，HMGA2不能反向調(diào)節(jié)let-7a的表達(dá)。
　　5.在鼻咽癌細(xì)胞中，通過(guò)let-7amimics上調(diào)let-7a的表達(dá)能明顯抑制鼻咽癌細(xì)胞株的遷移和侵