促腎上腺皮質(zhì)激素對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、研究目的:觀察促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH4-10)對成年 SD大鼠腎缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury，IRI)的影響，了解ACTH4-10對腎缺血再灌注損傷是否有保護作用及其可能機制，同時探討不同劑量 ACTH4-10干預處理對大鼠腎IRI的影響是否不同。
　　方法:將30只成年SD大鼠（3-4個月）隨機分為三組，每組10只，50mg ACTH4-10干預組（A組），200mg ACTH4-1

2、0干預組（B組），對照組（C組）。大鼠麻醉成功后固定，對照組（C組）采用鉗夾腎動脈法建立左腎缺血再灌注損傷模型，術前無干預措施；A組大鼠同C組一樣制成腎缺血再灌注模型，術前12小時皮下注射 ACTH4-10，劑量為50mg/kg；B組術前12小時皮下注射ACTH4-10，劑量為200mg/kg。術后24小時處死動物，采集大鼠靜脈血檢測血清肌酐（serum creatinine,Scr）、血清尿素氮（BUN）指標評價腎功能；取左腎行石蠟切

3、片采用HE染色光鏡觀察各組腎組織的變化；用免疫組化法檢測腎組織Caspase-3、HO-1蛋白表達的變化；利用Real-time RT-PCR技術檢測腎組織中Caspase-3mRNA、HO-1 mRNA的表達水平。
　　結果：1.BUN和 Scr:200mg ACTH4-10干預組較對照組腎功能明顯改善（P<0.05），200mg ACTH干預組較50mg ACTH4-10干預組腎功能明顯改善（P<0.05）,而50mg ACT

4、H4-10干預組較對照組腎功能有改善趨勢，但無顯著性差異（P>0.05）。
　　2.光鏡觀察：對照組表現(xiàn)為腎小管上皮細胞腫脹，空泡樣變性、壞死、脫落，管腔變窄或閉合，部分管腔變寬大，管腔內(nèi)有細胞管型，腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹，腎間質(zhì)出血明顯。200mg ACTH4-10干預組腎小球毛細血管充血減輕，腎小管上皮細胞空泡樣變性也明顯減輕、細胞結構基本趨于正常。50mgACTH4-10干預組見腎小管上皮細胞明顯水腫，而且腎小球和腎間質(zhì)

5、充血明顯。
　　3.免疫組化 Caspase-3、HO-1蛋白表達：與缺血再灌注組比，200mg ACTH4-10能明顯能減輕Caspase-3蛋白的表達，增強HO-1蛋白表達。
　　4.Caspase-3mRNA、HO-1mRNA表達：與免疫組化表達一致，200mg ACTH4-10能明顯減少Caspase-3 mRNA表達，增強HO-1mRNA表達。
　　結論：200mg ACTH4-10對大鼠腎臟缺血再灌注損傷有