蛋黃ACE抑制肽分離純化研究.pdf

1、蛋黃ACE抑制肽是蛋黃蛋白質(zhì)經(jīng)堿性蛋白酶水解所得的短肽混合物，具有明顯的體外降壓作用。本實(shí)驗(yàn)的研究旨在經(jīng)系列的分離純化程序，得到具有活性的降壓肽，為充分利用豐富的蛋黃蛋白質(zhì)，提高雞蛋利用價(jià)值和促進(jìn)農(nóng)業(yè)資源有效利用提供參考。 酶解液脫色實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，加入1.5％活性炭、溫度40℃、pH4.0的條件下脫色40min，脫色率達(dá)到83％，肽損失率5.6％。 用截留分子量為10kDa和3.5kDa超濾膜初步分離脫色酶解液，一級(jí)

2、、二級(jí)超濾溶液溫度分別為40℃和30℃、水解液濃度6％和操作壓力0.3MPa時(shí)2種超濾膜具有較好的通量，可分別達(dá)到19L·m<'-2>·h<'-1>和1.3L·m<'-2>·h<'-1>；分別檢測(cè)不同分子量段溶液ACE活性抑制率，結(jié)果顯示ACE抑制肽主要集中在分子量小于3.5kDa溶液中，ACE活性抑制率達(dá)到51.3％。 分子量小于3.5kDa的超濾液用離子交換和凝膠層析分離。當(dāng)乙酸鈉緩沖液pH4.1，洗脫液離子強(qiáng)度為1mol/

3、L NaCl、進(jìn)樣量(肽的質(zhì)量/樹脂濕體積)為10mg·mL<-1>，洗脫溫度35℃、流速控制在0.5mL/min時(shí)D61樹脂具有較好分離效果，洗脫峰對(duì)ACE抑制活性提高到62.7％，肽的總回收率為82.4％。離子洗脫峰經(jīng)Sephadex G-15凝膠層析分離。當(dāng)緩沖液乙酸銨濃度為0.1 mol/L、洗脫液流出速度0.5 mL/min、進(jìn)樣濃度40 mg/mL的條件下，肽的總回收率有90％，洗脫組分5<'＃>峰具有最強(qiáng)的ACE抑制活性。