SIRT1通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路增強(qiáng)ApoE---小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性.pdf

1、研究目的：
　　探討沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(SIRT1)是否通過(guò)抑制核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路增強(qiáng)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。
　　材料與方法：
　　將33只8周齡雄性ApoE-/-小鼠隨機(jī)分成三組，分別為高脂對(duì)照組(CHF組，n=11)、SIRT1激動(dòng)劑組（SRT組，n=11）、SIRT1激動(dòng)劑和抑制劑組（SRT+NAM組，n=11）。高脂飼料喂養(yǎng)16周后，分別給予生理鹽水、SRT1720、SRT1720和尼

2、克酰胺腹腔注射。用藥6周后處死小鼠，取血檢測(cè)血脂,分離主動(dòng)脈液氮速凍并儲(chǔ)存于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。每組隨機(jī)選取3條主動(dòng)脈進(jìn)行整體油紅染色比較三組間動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的大??；剩余的主動(dòng)脈分別制作胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈冰凍切片。胸主動(dòng)脈冰凍切片用于：HE染色形態(tài)學(xué)分析；油紅染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測(cè)胸主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中脂質(zhì)、膠原纖維、巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的含量；比較三組胸主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損指數(shù)的大小。腹主動(dòng)脈冰凍切

3、片用于激光捕獲顯微切割，實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)SIRT1、NF-κB、IL-1β、TNFα、MMP-2、MMP-9和TIMP1mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　用藥6周后，三組小鼠間體重、血脂差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　與CHF組相比，SRT組主動(dòng)脈整體斑塊面積減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而與CHF組相比，SRT+NAM組主動(dòng)脈整體斑塊面積大小差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　與

4、CHF組相比，SRT組胸主動(dòng)脈斑塊面積減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而與CHF組相比，SRT+NAM組胸主動(dòng)脈斑塊面積大小差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　與CHF組相比，SRT組胸主動(dòng)脈斑塊中巨噬細(xì)胞成分、脂質(zhì)成分和易損指數(shù)（易損指數(shù)=(巨噬細(xì)胞成分+脂質(zhì)成分)/(平滑肌細(xì)胞成分+膠原纖維成分)）顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；膠原纖維成分和平滑肌細(xì)胞成分顯著增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而

5、與CHF組相比，SRT+NAM組胸主動(dòng)脈斑塊中膠原纖維成分、平滑肌細(xì)胞成分、巨噬細(xì)胞成分、脂質(zhì)成分和易損指數(shù)之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　與CHF組相比，SRT組腹主動(dòng)脈斑塊中SIRT1和TIMP1 mRNA表達(dá)水平顯著增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；NF-κB、IL-1β、TNFα、MMP-2、MMP-9 mRNA表達(dá)水平顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而與CHF組相比，SRT+NAM組腹主動(dòng)