番茄紅素誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：化學(xué)治療是慢性髓性白血?。–ML）的主要治療途徑，但隨著該藥臨床應(yīng)用的推廣而出現(xiàn)耐藥。近期研究發(fā)現(xiàn)，番茄紅素具有抗癌抗腫瘤作用。本課題采用分子生物學(xué)技術(shù)，研究番茄紅素(Lycopene)對(duì)人慢性髓系白血病K562細(xì)胞凋亡的影響，探討其凋亡的作用機(jī)制，為番茄紅素治療CML提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:用不同濃度(0，20，40，60μmol·L-1)的番茄紅素作用K562細(xì)胞24 h，48 h，72 h，設(shè)0μmol·L-1組為空

2、白組即Ly0組，20μmol·L-1番茄紅素為L(zhǎng)y1組，40μmol·L-1番茄紅素為L(zhǎng)y2組，60μmol·L-1番茄紅素為L(zhǎng)y3組。采用MTT法檢測(cè)不同濃度組（Ly0、Ly1、Ly2、Ly3組）的番茄紅素作用24 h，48 h，72 h時(shí)K562細(xì)胞增殖抑制率；Annexin V/PI雙染色法檢測(cè)Ly0、Ly1、Ly2、Ly3組的番茄紅素作用48 h時(shí)K562細(xì)胞凋亡率；RT-PCR法檢測(cè)Ly0、Ly1、Ly2、Ly3組的番茄紅素作

3、用48 h時(shí) K562細(xì)胞中凋亡基因 Bcl-2及半胱天冬酶-3（Caspase-3）mRNA的表達(dá)情況。Western Blot法檢測(cè)Ly0、Ly1、Ly2、Ly3組的番茄紅素作用48 h時(shí)K562細(xì)胞中凋亡基因Bcl-2及半胱天冬酶-3（Caspase-3）蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：與空白Ly0組比較，Ly1、Ly2、Ly3組K562細(xì)胞的細(xì)胞增殖抑制率隨番茄紅素藥物作用濃度的增強(qiáng)而明顯升高，K562細(xì)胞增殖抑制率在番茄紅素

4、為60μmol·L-1濃度下可達(dá)到45.13％；Ly1、Ly2、Ly3組K562細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率隨番茄紅素藥物作用濃度的增強(qiáng)而明顯增加，凋亡率最高可以達(dá)到36.43%；與空白組比較，隨番茄紅素藥物作用濃度的升高，Ly1、Ly2、Ly3組K562細(xì)胞中Bcl-2 mRNA的表達(dá)量明顯降低，且Caspase-3 mRNA的表達(dá)量明顯升高；Ly1、Ly2、Ly3組K562細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá)量明顯降低，且Caspase-3蛋白的表達(dá)量明顯