磺?；樘腔窠?jīng)酰胺影響人肝癌細(xì)胞整合素αV的分子機(jī)制研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文學(xué)校代碼： 1 0 2 4 6學(xué) 號(hào)：0 8 1 1 0 1 0 2 3磺?；樘腔窠?jīng)酰胺影響人肝癌細(xì)胞整合素a V 的分子機(jī)制研究M o l e c u l a r M e c h a n i s m s o f s u l f a t e dl a c t o s y lc e r a m i d e r e g u l a t i o no fi n t e g r i na V i nh u m a m h

2、 e p a t o c e l l u a rc a r c i n o m a c e l l s院( 系、所) ：專(zhuān)業(yè)：姓名：導(dǎo)師：上海醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)吳偉．’吳興中教授完成日期：2 0 1 1 年4 月復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文磺?；樘腔窠?jīng)酰胺影響人肝癌細(xì)胞整合素G t V 的分子機(jī)制研究中文摘要腦苷脂( c e r e b r o s i d e ) 為細(xì)胞膜上的一類(lèi)脂質(zhì)分子，具有重要的生物學(xué)作用。C S T( c e

3、 r e b r o s i d es u l f o t r a n s f e r a s e ) 是一種腦苷脂磺?；D(zhuǎn)移酶，首先由K ．H o n k e 等從人的腎癌細(xì)胞中純化而來(lái)。讎要催化活性硫酸分子即硫酸3 ’磷酸腺苷5 ’磷酸硫酸( 3 ' - p h o s p h o ．a(chǎn) d e n o s i n e ．5 ’．p h o s p h o s u l l f a t e ，P A P S ) 的磺?；侥X苷

4、脂的半乳糖3 位羥基上，催化的產(chǎn)物為磺酰化腦苷脂，包括磺?；樘腔窠?jīng)酰胺( S u l f a t e d l a c t o s y lc e r a m i d e ，S u l f o ．L a c t o —C e r 或S M 3 ) 和磺?；肴樘腔窠?jīng)酰胺( g a l a c t o s y l c e r m i d es u l f a t e ，S M 4 ) ，但是在肝癌細(xì)胞主要為S u l f o ．L a

5、c t o ．C e r 。儺瑾因主要位于染色體2 2 q 1 2 。2 ，這個(gè)基因長(zhǎng)度2 2 k b ，包括8 個(gè)外顯子，其中6 個(gè)是編碼的，2 個(gè)是非編碼的，編碼的蛋白由4 2 3 個(gè)氨基酸殘基組成，位于高爾基體上，是I I 型跨膜蛋白，具有2 個(gè)潛在的N 糖基化位點(diǎn)，是磺酰化的腦苷脂合成過(guò)程中的一個(gè)終末限速酶。本實(shí)驗(yàn)室以前的研究表明腦苷脂磺酰基轉(zhuǎn)移酶a 汀基因催化的產(chǎn)物與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)，C S T在高轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，在低轉(zhuǎn)移

6、腫瘤細(xì)胞中低表達(dá)，而且磺?；X苷脂可以與一些和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移有重要關(guān)系的黏附分子相結(jié)合，如整合素、中腎細(xì)胞因子、血栓素和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子等。以前的結(jié)果也證實(shí)c s 丁l l 化產(chǎn)生磺酰化的腦苷脂可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞對(duì)層粘連蛋白和玻連蛋白的黏附性，從而促進(jìn)肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。另外本實(shí)驗(yàn)室以前研究還發(fā)現(xiàn)和C S 墻度同源的磺?；D(zhuǎn)移酶半乳糖：3 ．O ．磺酰基轉(zhuǎn)移酶．2 ( G a l ：3 - 0 ．s u l f o t r a n s f e r

7、 a s e ．2 ，G a l 3 S T - 2 ) 及其催化產(chǎn)物s u l f o —L e w i sx 能夠通過(guò)影響整合素的表達(dá)來(lái)參與肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移?；酋；揎検欠裨谀[瘤轉(zhuǎn)移中起一個(gè)特異性的作用，C 研’及其外源合成的磺?；樘腔窠?jīng)酰胺是如何影響腫瘤轉(zhuǎn)移的還不清楚，因此，在以前的研究基礎(chǔ)上，主要探討儺確催化產(chǎn)物磺?；樘腔窠?jīng)酰胺對(duì)整合素c 【V 亞基表達(dá)的影響及其可能的分子機(jī)制。研究分為以下兩部分。第一部分整合素u V 亞