疏肝清熱利濕法對阻黃肝功能及相關(guān)因子影響.pdf

1、阻塞性黃疸(簡稱阻黃)是由于膽道系統(tǒng)機械性阻塞，膽汁引流障礙，膽汁不能通過膽管排入十二指腸，膽汁中的膽紅素反流入血所致。 臨床上膽總管阻塞一段時間則會導致肝臟萎縮、肝細胞減少、纖維組織增生等，從而引發(fā)肝功能的損壞。目前對阻黃的治療主要是以手術(shù)解決梗阻為主，但術(shù)后病死率仍高達16％～30％，主要死因是術(shù)后肝功能衰竭。 目的：為了解決阻黃后肝功能受損這個問題，根據(jù)文獻研究我們篩選了疏肝清熱利濕中藥對阻黃治療進行研究：通過這類

2、中藥在阻黃術(shù)前和術(shù)后的治療，觀察疏肝清熱利濕類中藥在減少阻黃狀態(tài)下的肝功能損害及降低術(shù)后肝功能衰竭的發(fā)生率和死亡率方面是否能發(fā)揮作用：同時從分子生物學，肝細胞凋亡的角度，我們篩選出凋亡調(diào)控基因BCL-2、腫瘤壞死因子受體1(TNF-R1)、蛋白激酶C(PKC)等，并通過動物試驗，運用疏肝清熱利濕中藥對相關(guān)基因表達進行干預(yù)，探討疏肝清熱利濕中藥是否能夠抑制肝細胞的凋亡，從而起到護肝作用。 方法： 臨床病例的研究：

3、1．選擇符合診斷標準的阻塞性黃疸患者60例，隨機分為疏肝清熱利濕法治療組(簡稱治療組)30例，常規(guī)治療對照組(簡稱對照組)30例。 2．對患者手術(shù)前5天經(jīng)過治療后，對患者主要癥狀進行療效評分，將兩組癥狀評分治療前后對比，治療組和對照組進行組間比較及總有效率進行比較。 3．對患者入院后術(shù)前5天和手術(shù)當天(術(shù)前)和患者術(shù)后7天分別收集血生化中的ALT、AST、TBIL分別行組內(nèi)前后比較和兩組間的比較。 動物試驗部分的

4、研究： 1．選用健康雄性Wistar大鼠100只，隨機分為10個小組，分別為假手術(shù)組(3天處死)：結(jié)扎未施加因素組(3天處死)；3、7、14、21天處死中藥組共四組；3、7、14、21天處死鹽水組共四組。 2．假手術(shù)組、結(jié)扎未施加因素組3天處死后給予測膽紅素，兩組對比以確定造模是否成功。 3．中藥組給予疏肝清熱利濕藥(舒膽湯)灌胃，鹽水組給予0.9％生理鹽水灌胃，兩大組分別于3、7、14、21天處死，分別測各組的

5、膽紅素，觀察其變化情況。 4．取肝組織標本固定、包埋、染色，采用TUNEL法進行肝細胞凋亡的原位檢測，免疫組織化學SABC法檢測PKC、bcl-2、TNF-R1的表達，然后行中藥組與鹽水組兩組檢測指標統(tǒng)計對比。 結(jié)果： 臨床病例的研究結(jié)果： 1．手術(shù)前治療組病人治療后癥狀較治療前有明顯改善，與對照組比較，統(tǒng)計差異都有顯著性意義。 2．治療前后兩組患者癥狀療效比較，治療組總有效率為86.67％；對照

6、組總有效率為53.33％，兩組差異有顯著性意義。 3．疏肝清熱利濕中藥治療組在手術(shù)前治療后其AST、ALT明顯降低，組內(nèi)前后比較，與對照組組間對比，統(tǒng)計差異有顯著性意義； 4．治療組和對照組分別術(shù)前5天與術(shù)后7天比較AST，ALT，TBIL都有明顯的降低改善，術(shù)后7天兩組間比較統(tǒng)計差異有顯著性意義。 動物試驗部分的研究： 1．隨著時間的變化鹽水組與中藥組bcl-2蛋白的表達逐漸升高，直到21d達高峰，但各

7、時間段中藥組的bcl-2蛋白的表達較鹽水組都偏高，14d、21d組增高更為明顯，統(tǒng)計上有顯著性差異，說明清熱利濕中藥對bcl-2蛋白的表達可能有一定的促進作用，從而在對抗肝細胞凋亡有一定的作用。 2．隨著時間的變化鹽水組與中藥組PKC蛋白及TNF-R1蛋白的表達逐漸升高，14d達高峰，但各時間段中藥組的PKC蛋白及TNF-R1蛋白的表達較鹽水組相比均偏低，14d中藥組明顯較鹽水組表達偏低，統(tǒng)計上有顯著性差異，說明清熱利濕中藥對P

8、KC及TNF-R1的表達有一定的抑制作用，可能在對抗肝細胞凋亡有一定的作用。 3．隨著時間的變化鹽水組與中藥組細胞凋亡指數(shù)逐漸升高，14天達高峰，中藥組的細胞凋亡指數(shù)在各個時期較鹽水組明顯偏低，且在統(tǒng)計學上存在差異有顯著性意義。 結(jié)論：疏肝清熱利濕中藥對可明顯改善梗阻性黃疸患者圍手術(shù)期的肝功能，從而起到護肝作用；大鼠試驗證明疏肝清熱利濕中藥可明顯抑制PKC、TNF-R1的表達和促進bcl-2的表達，同時可明顯抑制肝細胞的