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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 觀察miR-21對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響,探討miR-21的生物學(xué)功能,并對(duì)其作用機(jī)理做更深入的研究,尋找診斷、治療膠質(zhì)瘤的新方法和途徑。 方法: 體外化學(xué)合成anti-miR-21,采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法導(dǎo)入膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞系中,應(yīng)用cck-8法及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其對(duì)U87細(xì)胞增殖及凋亡的影響;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后PDCD4和PTEN的mRNA水平;應(yīng)用Western blot檢測(cè)PDC
2、D4和PTEN基因蛋白表達(dá)。 結(jié)果: 抑制miR-21后對(duì)U87細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用,促進(jìn)了細(xì)胞凋亡;轉(zhuǎn)染anti-miR-21后PDCD4和PTEN mRNA和對(duì)照組相比無(wú)明顯變化;miR-21基因抑制后PDCD4和PTEN基因的蛋白表達(dá)增高。 結(jié)論: 應(yīng)用RNA干擾技術(shù)在轉(zhuǎn)染anti-miR-21后出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)阻滯,誘導(dǎo)凋亡,表明miR-21起到了一個(gè)類(lèi)似癌基因的作用,使miR-21基因沉默后
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