2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  缺血再灌注會(huì)對(duì)機(jī)體多種臟器(包括脾臟、肝臟和腎臟)造成損傷,使得組織中有大量炎癥介質(zhì)浸潤(rùn),導(dǎo)致細(xì)胞大量凋亡。本研究(1)觀察金屬硫蛋白Ⅰ/Ⅱ(MetallothioneinⅠ/Ⅱ,MTⅠ/Ⅱ)敲除(Knockout,KO)小鼠的飼養(yǎng)和繁殖過程;(2)采用左側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)建立WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注損傷模型,觀察N-乙酰半胱

2、氨酸(N-acetylcysteine,NAC)和SOD活性抑制劑二硫代氨基甲酸(diethyldithiocarbamic acid,DETC)對(duì)腦缺血再灌注后脾細(xì)胞的抗氧化作用,從免疫的角度,初步探討NAC和DETC對(duì)脾細(xì)胞作用的機(jī)制。
  方法:
  1.觀察MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠的飼養(yǎng)和繁殖過程。
  2.采用MCAO法建立WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血2h再灌注損傷模型。以假手術(shù)為對(duì)照,
  (1)

3、采用五點(diǎn)法,評(píng)價(jià)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注24h后神經(jīng)功能缺陷情況;
  (2)觀察缺血再灌注對(duì)小鼠脾臟臟體比和腦組織供血的影響;
  (3)采用MTT方法,檢測(cè)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注24 h后脾細(xì)胞活力的變化,以及NAC干預(yù)2h和DETC處理2h對(duì)脾細(xì)胞活力的影響;
  (4)檢測(cè)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注24 h時(shí)間點(diǎn),脾細(xì)胞及脾細(xì)胞給予NAC處理2h和DETC處理2h

4、后線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)開放程度;
  (5)檢測(cè)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注24 h時(shí)間點(diǎn),脾細(xì)胞及脾細(xì)胞給予NAC2 h和DETC處理2h后線粒體Ca2+攝取釋放情況;
  (6)用乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)測(cè)定試劑盒,檢測(cè)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注24h后LDH漏

5、出率的變化,以及NAC和DETC處理2h的作用。
  結(jié)果:
  1.MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠與野生鼠比較生殖能力要低一些,喜靜,容易長(zhǎng)腫物,對(duì)缺水耐受性低。
  2.NAC對(duì)腦缺血再灌注損傷MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細(xì)胞的影響
  (1)腦缺血再灌注24小時(shí),WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能缺陷。
  (2)缺血再灌注影響了小鼠腦組織的正常供血,導(dǎo)致部分缺血;且導(dǎo)致小鼠的脾臟體比下降,而金屬硫蛋

6、白在一定程度上抑制了缺血再灌注對(duì)脾臟體比的影響。
  (3)無(wú)論是WT還是MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠,與假手術(shù)對(duì)照組相比,缺血再灌注組對(duì)照組的脾細(xì)胞活力顯著下降(P<0.01);與缺血再灌注對(duì)照組相比,NAC干預(yù)后,脾細(xì)胞活力均顯著增強(qiáng)(P<0.01)。與WT相比,MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注后,脾細(xì)胞活力降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而MT-Ⅰ/ⅡKO缺血再灌注后經(jīng)過NAC干預(yù)后,脾細(xì)胞活力增加的強(qiáng)度比WT低,差異具有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。DETC處理抑制了WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠的脾細(xì)胞的活力(P<0.01);DETC處理進(jìn)一步抑制了WT(P<0.05)和MT-Ⅰ/Ⅱ KO(P<0.01)小鼠腦缺血再灌注后的脾細(xì)胞的活力;DETC對(duì)MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠的抑制作用比對(duì)WT小鼠的大。
  (4)無(wú)論是WT還是MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠,與假手術(shù)對(duì)照組相比,缺血再灌注組的OD540值降低,mPTP開放程度增大(P<0.01);與缺血再灌注對(duì)照組

8、相比,缺血再灌注NAC處理組的OD540值增加,mPTP開放程度減?。≒<0.01)。與WT缺血再灌注對(duì)照組相比,MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注對(duì)照組的OD540值降低,mPTP開放程度增大,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注NAC處理組的OD540值比WT缺血再灌注NAC處理組的低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。DETC處理對(duì)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠假手術(shù)組和缺血再灌注組的mPTP開放程度均沒有

9、顯著影響(P>0.05)。
  (5)無(wú)論是WT還是MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠,與假手術(shù)對(duì)照組相比,缺血再灌注組的OD值增高,Ca2+超載程度加深(P<0.01);與缺血再灌注對(duì)照組相比,缺血再灌注NAC處理組的OD值降低,Ca2+超載程度較低(P<0.01)。與WT缺血再灌注對(duì)照組相比,MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注對(duì)照組的OD值較高, Ca2+超載程度加深,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注NAC處理

10、組的OD值、Ca2+超載程度比WT缺血再灌注NAC處理組的高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。DETC處理對(duì)WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠假手術(shù)組和缺血再灌注組的Ca2+超載程度均沒有顯著影響(P>0.05)。
  (6)無(wú)論是WT還是MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠,與假手術(shù)對(duì)照組相比,缺血再灌注組的乳酸脫氫酶漏出率增高(P<0.01);與缺血再灌注對(duì)照組相比,缺血再灌注NAC處理組的乳酸脫氫酶漏出率降低(P<0.01)。與WT缺血再灌

11、注對(duì)照組相比,MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注對(duì)照組的乳酸脫氫酶漏出率較高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而MT-Ⅰ/Ⅱ KO缺血再灌注NAC處理組的乳酸脫氫酶漏出率比WT缺血再灌注NAC處理組的高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。DETC處理促進(jìn)了WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠的乳酸脫氫酶的漏出(P<0.01);DETC處理進(jìn)一步促進(jìn)了WT和MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠腦缺血再灌注后的乳酸脫氫酶的漏出(P<0.01);DETC對(duì)MT-Ⅰ

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