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1、研究目的:大約三分之一的癲癇患者對(duì)藥物治療不敏感其原因主要是腦組織的血腦屏障的內(nèi)皮細(xì)胞和星型膠質(zhì)細(xì)胞上表達(dá)的多重耐藥蛋白(multi-drugresistanceprotein,MDR)的作用,是MDR將進(jìn)入細(xì)胞的抗癲癇藥物在ATP的作用下,把細(xì)胞內(nèi)的抗癲癇藥物泵出細(xì)胞而使細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度下降,而抗癲癇治療失敗。PGP(P-Glycoprotein)是MDR蛋白家族中的重要一員。而RNA干擾(RNAinterfering,RNAi)是新
2、近發(fā)現(xiàn)的一種通過(guò)小分子量的RNA與相應(yīng)的mRNA相結(jié)合,并將其剪切成碎片,而終止DNA向蛋白表達(dá)的一種現(xiàn)象。通過(guò)RNAi方法抑制PGP的表達(dá)以改善癲癇多重耐藥現(xiàn)象,而尋求耐藥癲癇的治療的途徑。 材料與方法:通過(guò)設(shè)計(jì)三對(duì)能夠表達(dá)小干擾RNA(smallinterferingRNA,siRNA)的DNA序列,構(gòu)建含有相應(yīng)DNA序列的p-SIRENshuttle質(zhì)粒,將其轉(zhuǎn)染通過(guò)馬桑內(nèi)酯誘導(dǎo)的已表達(dá)多重耐藥蛋白的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,通過(guò)逆轉(zhuǎn)
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