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文檔簡介
1、目的:研究在體外培養(yǎng)的腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中,垂體瘤轉(zhuǎn)化基因(PTTG)在胰島素樣生長因子1(IGF-1)作用下的表達(dá)情況,探討IGF-1在腦膠質(zhì)瘤中對PTTG表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及主要作用途徑。 方法:收集山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)外科2008年7月到2008年10月的腦膠質(zhì)瘤患者新鮮手術(shù)標(biāo)本7例,將膠質(zhì)瘤組織進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng),并成功傳代,經(jīng)病理學(xué)診斷及免疫組織化學(xué)檢測標(biāo)志蛋白質(zhì)——膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP),鑒定為膠質(zhì)瘤細(xì)胞。分別以10n
2、g/ml、20ng/ml、50ng/ml濃度的IGF-1在體外作用于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT—PCR)檢測PTTG mRNA的表達(dá);先用磷脂酰肌醇3—激酶(PI3K)細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路的特異性蛋白激酶抑制劑(LY294002)50μ M在體外作用于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞30分鐘后,再用50ng/ml濃度的IGF-1作用于膠質(zhì)瘤細(xì)胞,用RT—PCR檢測各對照組,實驗組中PTTGmRNA表達(dá)。 結(jié)果:與空白對照組比較,R
3、T—PCR檢測結(jié)果顯示PTTG mRNA的表達(dá)在各IGF-1作用組均顯著增高,增高程度隨IGF-1濃度的升高而遞增,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),各組兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 經(jīng)LY294002處理,再加入IGF-1的實驗組,與只加有IGF-1的對照組比較,PTTG mRNA的表達(dá)顯著降低,兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);再與只加有LY294002的對照組比較,兩者PTTG mRNA表達(dá)
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