生物轉(zhuǎn)化大果沙棘黃酮苷元工藝及產(chǎn)物抗氧化活性研究.pdf

1、沙棘屬植物的果實(shí)中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，近年來大量的醫(yī)學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)，沙棘黃酮具有降低膽固醇、抗氧化、抗炎和抗癌、抗輻射、抗心肌缺血、抗心率失常等多種功效，沙棘黃酮產(chǎn)品的開發(fā)前景廣闊。沙棘果實(shí)中的黃酮類化合物通常以糖苷的形式存在，經(jīng)研究，黃酮苷的抗氧化活性低于所對(duì)應(yīng)的苷元的抗氧化活性，而通過生物轉(zhuǎn)化法可以將黃酮苷轉(zhuǎn)化為苷元，提高其抗氧化活性。目前，我國(guó)對(duì)沙棘黃酮類化合物的研究主要在分離提取、生物活性及結(jié)構(gòu)研究等方面，對(duì)其生物轉(zhuǎn)化的研究較

2、少。本文研究了大果沙棘中黃酮類化合物的提取工藝及其純化方法，并用生物轉(zhuǎn)化法將沙棘黃酮糖苷轉(zhuǎn)化為苷元，提高其抗氧化活性，并考察了生物轉(zhuǎn)化的條件對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物抗氧化活性的影響。
　　目前，大果沙棘總黃酮的提取方法主要有水提法、有機(jī)溶劑提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法和超臨界流體萃取法。本文采用溶劑法提取大果沙棘總黃酮，并在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)面分析法考察乙醇的體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、固液比、提取時(shí)間對(duì)總黃酮得率的影響，并對(duì)提取工

3、藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳提取條件:提取溫度為61.85℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)為71.36％，提取時(shí)間為2.59h，液固比為18.33∶1，此條件下黃酮得率為0.741％。同其它方法比較，此方法設(shè)備簡(jiǎn)單，成本低，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
　　本文選用大孔樹脂為層析介質(zhì)純化沙棘總黃酮，并研究了上樣液pH值、上樣液流速、上樣液濃度、洗脫液濃度幾個(gè)因素對(duì)吸附和解析過程的影響。最佳純化條件為:洗脫液為60％乙醇，上樣液pH值為3，上樣液流速為1mL/m

4、in，上樣液濃度為0.96mg/mL。
　　純化后的黃酮用黑曲霉、綠色木霉、灰色鏈霉菌和總狀毛霉等菌株進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，最終篩選出黑曲霉和灰色鏈霉菌作為轉(zhuǎn)化菌株。然后分別考察了培養(yǎng)基初始pH值、轉(zhuǎn)化溫度、轉(zhuǎn)化時(shí)間，底物添加量和接種量等幾個(gè)因素對(duì)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的影響。以黑曲霉為轉(zhuǎn)化菌種時(shí)，最佳培養(yǎng)條件分別為:培養(yǎng)溫度為34℃、轉(zhuǎn)化時(shí)間為3天、底物添加量為6％、培養(yǎng)基初始pH值為5.5、接種量為9％;在此條件下大果沙棘總黃酮羥自由基清除率和總抗