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文檔簡介
1、目的:本課題以胃腺癌細胞株SGC7901和胃癌組織為研究對象,通過檢測Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA和蛋白在正常胃黏膜細胞株GES-1及胃腺癌細胞株SGC7901中的表達,結合Wnt5a在胃癌和癌旁遠端正常組織的表達,探究Wnt5a的表達在胃癌發(fā)生和發(fā)展中的作用,揭示Wnt5a、β-catenin、E-cadherin在胃癌細胞信號轉導中的作用,為胃癌的臨床免疫治療帶來新的希望,建立更加有效的治療方法。<
2、br> 方法:體外培養(yǎng)正常胃黏膜細胞株GES-1及胃腺癌細胞株 SGC7901,Realtime-PCR技術測定其Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA的表達;Western-blot法檢測其Wnt5a、β-catenin、E-cadherin蛋白的表達。同時,收集臨床上未經化療和放療的胃癌標本55例,行臨床病理組織分型和臨床分期,同時取遠端癌旁組織28例(均證實無癌細胞)為正常對照,行常規(guī)石蠟包埋、切片,免疫
3、組化法(SP法)檢測胃癌組織和癌旁組織Wnt5a的表達。
結果:(1)在正常胃黏膜細胞GES-1及胃腺癌細胞SGC7901均可檢測到Wnt5a、β-catenin、E-cadherin mRNA的表達及Wnt5a、β-catenin、E-cadherin蛋白的表達。(2) SGC7901細胞的Wnt5a、β-catenin mRNA和蛋白表達水平均高于正常胃黏膜上皮細胞株GES-1(P<0.01),而GES-1細胞的E-cad
4、herin mRNA和蛋白表達水平高于SGC7901細胞(P<0.01)。(3)免疫組化SP法檢測Wnt5a的表達,結果顯示,胃癌組織和癌旁組織中均有Wnt5a的表達,但胃癌組織Wnt5a的蛋白表達陽性率顯著高于遠端癌旁的胃黏膜組織,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);55例胃癌組織中Wnt5a蛋白的表達與患者性別、淋巴結轉移、TNM分期有關系(P<0.05),而與患者的年齡、腫瘤大小、腫瘤發(fā)生部位均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
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