舒脈膠囊與單硝酸異山梨酯聯(lián)合預處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、目的；通過建立在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型和缺血預適應模型，觀察心肌缺血再灌和缺血預適應后血液及組織中相關指標的變化，研究舒脈膠囊和單硝酸異山梨酯是否具有IPC樣心肌保護作用及其作用機制，并探討兩藥低劑量合用的協(xié)同作用。 方法；108只Wistar大鼠隨機分為9組：①假手術組(SIR組，NS5ml/kg/d)開胸后僅在冠脈下穿線不結扎；②缺血再灌損傷組(IR組，NS5ml/kg/d)結扎左冠狀動脈前降支30分鐘，再灌注2小時復

2、制在體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型；③缺血預適應組(IPC組，NS5ml/kg/d)先行冠脈結扎，缺血5min，再灌5min，反復循環(huán)3次，制作缺血預適應模型，然后行缺血30min，再灌2h；④舒脈膠囊組(SM組，100mg/Kg/d)；⑤舒脈膠囊+優(yōu)降糖組(SM+GLI組，SM100mg/Kg/d)；⑥單硝酸異山梨酯組(IM組，10mg/Kg/d)；⑦單硝酸異山梨酯+優(yōu)降糖組(IM+GLI，IM10mg/Kg/d)；⑧舒脈膠囊與單硝酸異

3、山梨酯合用組(SM+IM組，SM50mg/Kg/d+IM5mg/Kg/d)；⑨舒脈膠囊+單硝酸異山梨酯+優(yōu)降糖組(SM+IM+GLI組，SM50mg/Kg/d，IM5mg/Kg/d)。舒脈膠囊、單硝酸異山梨酯、NS均連續(xù)灌胃7天，手術前1小時再給藥一次；優(yōu)降糖于末次給藥前30min以0.3g/Kg腹腔注射。動物麻醉后以標準Ⅱ導聯(lián)記錄術前、缺血后15min、再灌即刻、再灌1h、再灌2h各時間點心電圖；計算各組心電圖ST段、T波高度變化以及

4、病理性Q波出現(xiàn)數(shù)目；再灌2小時后，摘取眼球取血5ml，化學比色法測定血清SOD、MDA、CK、NO水平，放免法測定血漿降鈣素基因相關肽(CGRP)、6-酮—前列腺素F1α等指標的變化；心室肌切片后用NBT染色，以非染色區(qū)與全部心肌片的面積比表示心肌梗死范圍；在結扎線以下取2cm厚的心肌組織，免疫組化切片檢測蛋白激酶C(PKC)蛋白含量；取心尖組織，RT-PCR檢測PKCmRMA含量。 結果；(1)心電圖改變：缺血預適應組和各治療

5、組所測時間點心電圖ST段、T波恢復明顯優(yōu)于缺血再灌損傷組，病理性Q波的出現(xiàn)顯著減少(P＜0.05)，各治療藥物合用優(yōu)降糖的對照組ST段、T波明顯升高、病理性Q波的出現(xiàn)明顯增多，與治療組相比具有顯著性差異(P＜0.05)。(2)心肌梗死面積：缺血預適應組和各治療組心肌梗死范圍分別為：16.67％+2.15％、20.05％±3.44％、26.28％±2.10％、30.19％±3.46％，較缺血再灌損傷組(40.49％±10.88％)明顯降低

6、(P＜0.01)，各治療組的優(yōu)降糖對照組心肌梗死范圍為39.06％±4.80％、40.47％±4.14％、40.92％±2.92％，與治療組比差異顯著(P＜0.01)。(3)生化指標：缺血預適應組和各治療組較缺血再灌損傷組SOD、NO、CGRP、6-酮前列腺素F1α顯著升高，MDA、CK顯著降低；各治療組的優(yōu)降糖對照組SOD活性，MDA、CK、NO含量與治療組相比均有顯著性差異，CGRP、6-酮前列腺素F1α水平與治療組相比無顯著性差異

7、。(4)PKC：免疫組化結果表明，預適應組和治療組心肌組織PKC蛋白表達高于模型組，治療組高于各自對照組，組間比較差異顯著；RT-PCR結果顯示：預適應組和治療組心肌組織PKC-εmRNA表達高于模型組，治療組高于各自對照組，并有顯著性差異。各治療組的優(yōu)降糖對照組PKC蛋白和PKC-εmRNA表達與治療組相比無顯著性差異。 結論；舒脈膠囊和單硝酸異山梨酯單用及兩藥低劑量合用均可對心肌缺血再灌注損傷產生保護作用，提示兩藥合用是有效