苯并[a]芘(BaP)促進(jìn)小鼠腹主動(dòng)脈瘤形成的機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究香煙煙霧的重要成分苯并[a]芘(BaP)對(duì)C57BL/6N小鼠腹主動(dòng)脈瘤（AAA）形成的影響，探討B(tài)aP在小鼠腹主動(dòng)脈瘤發(fā)病過(guò)程中的作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法:48只7-9月齡，雄性，C57BL/6N小鼠分為四組:對(duì)照組:腹腔注射中鏈甘油三酯5ml/kg體重，每周一次。AngⅡ組:背部植入AngⅡ微量滲透泵（AngⅡ溶于無(wú)菌生理鹽水，每只泵均注入168μL的AngⅡ溶液，放置于37℃水浴箱中12小時(shí)備用，藥物緩釋泵

2、持續(xù)釋放AngⅡ0.72mg/kg/day，釋放速度0.25μL/hr，持續(xù)4周），同時(shí)腹腔注射中鏈甘油三酯5ml/kg體重，每周一次。BaP組:將BaP以10mg/kg體重的劑量溶解于中鏈甘油三酯，配成2mg/ml的溶液，以5ml/kg體重進(jìn)行腹腔注射，每周一次。AngⅡ/BaP復(fù)合物組:背部植入AngⅡ微量滲透泵，同時(shí)腹腔注射溶解了BaP的中鏈甘油三酯，劑量及方法同前。處理5周后取各組小鼠腹主動(dòng)脈觀察大體標(biāo)本形態(tài);切片行HE染色觀察

3、血管結(jié)構(gòu)，masson染色觀察血管壁膠原纖維改變情況;圖像分析儀檢測(cè)各小鼠腹主動(dòng)脈最大周長(zhǎng)及各組小鼠腹主動(dòng)脈平均血管周長(zhǎng)。采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組腹主動(dòng)脈巨噬細(xì)胞侵潤(rùn)，MMP-2、MMP-9、MMP-12、NF-κ B的表達(dá)結(jié)果;TUNEL-POD法檢測(cè)血管壁平滑肌細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.處理5周后取各組小鼠腹主動(dòng)脈，大體標(biāo)本顯示AngⅡ組、AngⅡ/BaP復(fù)合組有腹主動(dòng)脈瘤形成。AngⅡ/BaP復(fù)合物

4、組腹主動(dòng)脈瘤形成率為41.67％明顯高于AngⅡ組腹主動(dòng)脈瘤形成率25％(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中AngⅡ/BaP復(fù)合物組一只小鼠出現(xiàn)AAA破裂。
　　 2.各組腹主動(dòng)脈（瘤）標(biāo)本切片，HE染色顯示AngⅡ/BaP復(fù)合組動(dòng)脈瘤破裂處彈性纖維紊亂，血管中膜顯著變薄，血管壁局部向外膨出;masson染色顯示AngⅡ/BaP復(fù)合物組血管壁膠原纖維丟失明顯。圖像分析儀檢測(cè):AngⅡ/BaP復(fù)合物組腹主動(dòng)脈平均周長(zhǎng)(1.40±0.25)

5、 mm，明顯大于AngⅡ組腹主動(dòng)脈平均周長(zhǎng)(1.2±0.23)mm，P＜0.05。
　　 3.免疫組織化學(xué)法檢測(cè)顯示小鼠腹主動(dòng)脈壁巨噬細(xì)胞的侵潤(rùn)在AngⅡ/BaP復(fù)合物組(0.56±0.12)與AngⅡ組(0.27±0.08)比較，明顯增多，P＜0.05。AngⅡ/BaP復(fù)合物組小鼠腹主動(dòng)脈壁MMP-2表達(dá)(0.47±0.13)，MMP-9表達(dá)(0.49±0.14)，MMP-12表達(dá)(0.49±0.11)，NF-κB表達(dá)(0.4

6、2±0.12)與AngⅡ組小鼠腹主動(dòng)脈壁MMP-2表達(dá)(0.25±0.06)，MMP-9表達(dá)(0.24±0.09)，MMP-12表達(dá)(0.24±0.09)，NF-κB表達(dá)(0.23±0.06)比較明顯增加，兩組各檢測(cè)指標(biāo)相比P值均小于0.05。
　　 4.TUNEL-POD法檢測(cè)各組小鼠腹主動(dòng)脈壁平滑肌細(xì)胞凋亡情況，結(jié)果顯示AngⅡ/BaP復(fù)合物組血管壁平滑肌細(xì)胞凋亡率為(31±l2％)顯著大于AngⅡ處理組平滑肌細(xì)胞凋亡率(1