尼古丁誘導主動脈瘤形成及分子機制研究.pdf

1、背景:吸煙是主動脈瘤形成的主要危險因素之一，然而哪種成分發(fā)揮促瘤作用尚不明確。尼古丁是香煙的主要成分，能夠誘導血管細胞基質金屬蛋白酶表達，因此有誘導主動脈瘤形成的潛力。JNK信號通路在人類和動物實驗主動脈瘤組織表達增加，α7-nAChRs是尼古丁的受體，在血管細胞表達，因此有可能是調節(jié)尼古丁誘導主動脈瘤的信號分子。
　　方法:動物實驗:為了證實尼古丁是否能夠誘導主動脈瘤的形成，我們用尼古丁、血管緊張素Ⅱ或二者聯合持續(xù)灌注10-12

2、個月齡的雄性C57BL/6J小鼠28天，鹽水灌注小鼠作為對照;為了驗證JNK信號通路直接參與主動脈瘤形成的假設，我們給尼古丁和血管緊張素Ⅱ聯合灌注的小鼠皮下注射JNK抑制劑SP600125或DMSO，持續(xù)28天。主要觀察小鼠主動脈瘤的發(fā)病率、死亡率，基質金屬蛋白酶在主動脈組織表達以及與巨噬細胞的共定位，p-JNK在主動脈組織的表達等。體外實驗:尼古丁處理小鼠巨噬細胞(RAW264.7)，觀察對基質金屬蛋白酶和粘附分子表達的影響;JNK抑

3、制劑SP600125和α7-nAChRs受體阻滯劑PNU-282987處理細胞，觀察對尼古丁誘導的基質金屬蛋白酶和粘附分子表達的影響。
　　結果:尼古丁和低劑量的血管緊張素Ⅱ聯合誘導了主動脈瘤的形成和早期破裂死亡，JNK抑制劑有降低主動脈瘤的發(fā)生和死亡的趨勢?；|金屬蛋白酶在主動脈中膜和外膜表達增加，巨噬細胞主要浸潤血管外膜。中膜基質金屬蛋白酶呈局限性表達，并常定位到破裂位點，且具有基質金屬蛋白酶亞型選擇性。在巨噬細胞，尼古丁以濃

4、度依賴性方式誘導p-JNK、VCAM-1、MMP-2和MMP-9的表達，5ng/ml時明顯增強，500ng/ml時明顯抑制。而SP600125和PNU-282987明顯抑制或消除了5ng/ml尼古丁的上述作用，而且PNU-282987也抑制了JNK的磷酸化。
　　結論:尼古丁和血管緊張素Ⅱ聯合誘導老年雄性C57BL/6J小鼠主動脈瘤形成和破裂死亡?；|金屬蛋白酶在中膜的局限性亞型選擇性表達方式可能在其中發(fā)揮重要作用。炎癥反應也參與