GOLPH3調(diào)節(jié)EGFR的內(nèi)吞降解促進(jìn)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖機(jī)制的作用研究.pdf

1、目的：檢測高爾基磷酸化蛋白3(GOLPH3)的核酸和蛋白水平與腦膠質(zhì)瘤發(fā)生的相關(guān)性；觀察GOLPH3對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、凋亡的影響；探索GOLPH3影響膠質(zhì)瘤增殖的機(jī)制，從而為膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：(1)采用免疫印跡(WB)檢測GOLPH3在非腫瘤腦組織及腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況。(2)通過Lipofectamine2000將GOLPH3 siRNA轉(zhuǎn)染到膠質(zhì)瘤U251及U87細(xì)胞，運(yùn)用WB方法鑒定GOLPH3 si

2、RNA的干擾效率。(3)分別以流式細(xì)胞術(shù)和CCK8法檢測下調(diào)GOLPH3對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡、增殖能力的影響。(4)應(yīng)用WB、免疫熒光法檢測下調(diào)GOLPH3的表達(dá)對(duì)EGFR的降解、內(nèi)吞及其下游信號(hào)的影響。
　　結(jié)果：1.與非腫瘤腦組織相比，GOLPH3在膠質(zhì)瘤組織中呈高表達(dá)(P<0.05)。2.三條目的小干擾轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，GOLPH3的蛋白水平均顯著降低(P<0.05)，干擾效果達(dá)60％-80%。3.在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，下調(diào)GOLPH3

3、的表達(dá)能夠增加細(xì)胞的凋亡率(P<0.05)和降低細(xì)胞增殖率(P<0.05)。4.在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，下調(diào)GOLPH3能夠促進(jìn)EGFR的內(nèi)吞、降解，并減弱EGFR的活化及其下游AKT信號(hào)通路的激活。
　　結(jié)論：1.GOLPH3在腦膠質(zhì)瘤中高表達(dá)，表明GOLPH3可能參與人腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。2.下調(diào)GOLPH3表達(dá)能夠抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡。3.GOLPH3對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響可能是通過調(diào)節(jié)EGFR的內(nèi)吞與降解，