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文檔簡介
1、目的：檢測高爾基磷酸化蛋白3(GOLPH3)的核酸和蛋白水平與腦膠質(zhì)瘤發(fā)生的相關(guān)性；觀察GOLPH3對膠質(zhì)瘤細胞增殖、凋亡的影響；探索GOLPH3影響膠質(zhì)瘤增殖的機制，從而為膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點。
方法：(1)采用免疫印跡(WB)檢測GOLPH3在非腫瘤腦組織及腦膠質(zhì)瘤組織中的表達情況。(2)通過Lipofectamine2000將GOLPH3 siRNA轉(zhuǎn)染到膠質(zhì)瘤U251及U87細胞，運用WB方法鑒定GOLPH3 si
2、RNA的干擾效率。(3)分別以流式細胞術(shù)和CCK8法檢測下調(diào)GOLPH3對膠質(zhì)瘤細胞凋亡、增殖能力的影響。(4)應(yīng)用WB、免疫熒光法檢測下調(diào)GOLPH3的表達對EGFR的降解、內(nèi)吞及其下游信號的影響。
結(jié)果：1.與非腫瘤腦組織相比，GOLPH3在膠質(zhì)瘤組織中呈高表達(P<0.05)。2.三條目的小干擾轉(zhuǎn)染48小時后，GOLPH3的蛋白水平均顯著降低(P<0.05)，干擾效果達60％-80%。3.在膠質(zhì)瘤細胞中，下調(diào)GOLPH3
3、的表達能夠增加細胞的凋亡率(P<0.05)和降低細胞增殖率(P<0.05)。4.在膠質(zhì)瘤細胞中，下調(diào)GOLPH3能夠促進EGFR的內(nèi)吞、降解，并減弱EGFR的活化及其下游AKT信號通路的激活。
結(jié)論：1.GOLPH3在腦膠質(zhì)瘤中高表達，表明GOLPH3可能參與人腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。2.下調(diào)GOLPH3表達能夠抑制膠質(zhì)瘤細胞增殖，促進膠質(zhì)瘤細胞凋亡。3.GOLPH3對膠質(zhì)瘤細胞增殖與凋亡的影響可能是通過調(diào)節(jié)EGFR的內(nèi)吞與降解，
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